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慢生型大豆根瘤菌GX201与固氮相关的putA、lrp基因的研究

摘要该研究运用分子生物学方法,克隆并测定了慢生型大豆根瘤菌的putA、lrp基因序列,通过BLAST软件分析发现,lrp基因存在putA基因的上游且转录方向相反.将含有gus报告基因的转座子Tn5gusA5转座到以pLAFR3为载体的重组质粒pGXN300后,利用pLAFR3与pPHIJI质粒的不相容性建立了一套适合于慢生型大豆根瘤菌的转座子诱变体系,应用该体系诱变慢生型大豆根瘤菌GX201,成功地构建了putA、lrp基因的突变体GX20108和GX20120.根据已测定的慢生型大豆根瘤菌的putA、lrp基因序列,设计一对核苷酸引物,PCR扩增putA基因的调控调区,研究lrp基因与putA基因的相互作用机制,离体试验证明putA基因的启动子区存在一个与lrp基因相关蛋白结合区域.

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