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SpltMNPVODV受体和受体结合蛋白的研究

摘要该文首次对斜纹夜蛾核多角体病毒(Spodopteralituramultinucleocapsidnucleopolyhdrovirus,SpltMNPV)包埋型病毒(occlusionderivedvirus,ODV)的受体、病毒受体结合蛋白以及SpltMNPV特有基因之一的splt137进行了研究.在SpltMNPV包埋型病毒(ODV)受体的研究中采用了病毒铺覆蛋白印迹技术(virusoverlayproteinbindingassay,VOPBA).用蔗糖密度梯度离心法提纯斜纹夜蛾核多角体病毒包埋型病毒粒子,以此病毒粒子作抗原,免疫家兔获得抗体,制备的ODV抗体不与中肠蛋白发生明显的交叉反应,表明提取的ODV抗原纯净,所得到的抗血清适合用于VOPBA分析.用SDS裂解缓冲液提取斜纹夜蛾幼虫中肠组织细胞总蛋白,采用病毒铺覆蛋白印迹技术,利用抗ODV抗血清对病毒受体进行检测.在SpltMNPV包埋型病毒受体研究的基础上,同样用免疫学方法对ODV囊膜上的受体结合蛋白进行了检测.结合试验表明,Splt137没有直接参与病毒入侵过程中的受体识别作用,即不能被直接称为受体结合蛋白,但是不能排除其在入侵过程中发挥作用.因为从不适当储存的病毒多角体中提纯的病毒粒子上,Splt137蛋白已经大部分降解.而这些不适当储存的病毒对斜纹夜蛾幼虫的毒力明显下降,表明Splt137与保持病毒的侵染力之间具有重要的关系.

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