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摘要背景与目的:鹦鹉热衣原体（Chlamydia psittaci,简写为C.psittaci)是一种人畜共患病原体，近年来Cpsittaci在人医临床上的报道较多。该病原体不同类型的诊断技术在临床上均比较缺乏，且流行病学调查数据少。本研究旨在建立针对鹦鹉热衣原体抗体、核酸、抗原的三种检测方法，结合衣原体分离培养实验，同时调查鹦鹉热衣原体、家禽衣原体、猪衣原体等在国内养殖动物中的流行现状，确认相关的病原体，补充流行病学调查数据。<br>　　方法:1）抗体检测:优化IncA多肽作为抗原的C.psittaci抗体ELISA检测方法，将其应用于动物血清检测。通过原核系统表达DsbC-IncA融合蛋白作为特异抗原，建立C.psittaci抗体ELISA检测方法，收集动物血清，调查动物血清样本中C.psittaci抗体阳性率，对结果统计分析;2）核酸检测:依据衣原体种特异性序列设计引物和探针并验证性能，从国内部分地区采集哺乳动物和家禽的组织、拭子、血液等不同类型的样本，结合其他衣原体种核酸检测方法调查衣原体感染率;同时检测来自肺炎患者的样本，并对其测序分型;3）制备抗体建立抗原检测方法:通过细胞融合技术制备特异性识别C.psittaci的单克隆抗体，将其应用于免疫荧光以在实验室中检测C.psittaci抗原。4）C.psittaci分离培养:以Hep-2为宿主细胞，接种C.psittaci阳性的病料，通过qPCR、IFA验证结果，对分离出的C.psittaci菌株进行三代测序。<br>　　结果:1）成功建立IncA多肽和DsbC-IncA蛋白作为抗原的两种C.psittaci抗体ELISA检测方法。分别在国内多个地区收集并检测1527份和1351鸡血清，这些血清分为种鸡和商品鸡两类。不同地域中种鸡血清总体的流行范围在42.3％-98.3％,商品鸡血清总体的流行范围在11.3％-28.2％。统计结果表明在各地区种鸡血清抗体流行率均显著高于商品鸡血清。2）基于C.psittaci特异性的IncA序列成功设计出引物和探针，经验证无非特异性扩增，检测限达5 copies,共计检测哺乳动物、家禽、宠物中采集的371份动物组织、各部位拭子、血液等样本，C.psittaci总的流行范围在0％-40％,采自羊和鸡的样本中检测到流产衣原体和家禽衣原体;在一份采自肺炎患者的肺泡灌洗液样本中检测到C.psittaci,经测序分型确认患者感染B基因型C.psittaci,传染源为患者家中饲养的鸽子。3）以衣原体LPS作为抗原免疫BALB/c小鼠，经细胞融合获得491株单克隆杂交瘤细胞，经筛选获得11株稳定传代且持续分泌LPS抗体的杂交瘤细胞，经免疫荧光检测，在11株杂交瘤细胞中有2株能同时识别鹦鹉热衣原体和沙眼衣原体，有1株特异性识别C.psittaci,并应用于实验室中衣原体菌株的检测，制备的抗体有望应用于衣原体的快速检测。4）将C.psittaci核酸检测阳性的鸽子脾脏样本处理后接种至Hep-2细胞，从鸽子脾脏样本分离出一株C.psittaci,qPCR与IFA检测结果为阳性，测序组装后得到1168344 bp的全长序列与7553 bp的质粒序列。