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ZE21B合金酶响应药物基因共负载聚合物纳米涂层的研究

摘要心血管疾病(CVD)是世界上发病率和死亡率最高的疾病。根据世界卫生组织的预测,到2030年,全球每年将有超过2300万人死于心血管疾病。支架经皮冠状动脉介入治疗(PCI)是治疗心血管疾病的有效手段之一。镁及其合金因其具有良好的力学性能和生物可降解性,已成为下一代生物可降解血管支架材料的研究热点。然而,镁合金血管支架在实际临床应用中仍面临体内降解速率快、生物相容性差的问题。表面改性是提高镁合金血管支架使用性能的有效策略。本论文在ZE21B合金表面通过表面改性技术构建了酶响应药物基因共负载聚合物纳米涂层,涂层中的靶向载药纳米颗粒能够酶响应释放并选择性抑制平滑肌细胞(SMCs)的粘附与增殖,同时涂层中的载基因纳米颗粒能够酶响应释放并靶向促进内皮细胞(ECs)的迁移和增殖,实现血管支架用镁合金表面的药物和基因联合靶向治疗,从而有效避免支架植入后内膜增生和再狭窄的发生。<br>  在本论文中,首先合成了两亲性聚合物PLGA-PEI-PEG-CVAPGW和PLMD-PEI-PEG-CREDVW,核磁共振氢谱(1H NMR)证明了两种聚合物的成功合成。将聚合物PLGA-PEI-PEG-CVAPGW作为药物载体,聚合物PLMD-PEI-PEG-CREDVW作为基因载体,通过自组装方法制备了靶向载药纳米颗粒(R-NPs)和靶向载基因纳米颗粒(V-NPs)。利用TEM和马尔文粒径电位仪对靶向载药纳米颗粒和靶向载基因纳米颗粒的微观形貌、粒径电位和尺寸分布进行了表征分析,结果表明两种纳米颗粒的粒径和电位均适于被细胞摄取和内吞。细胞摄取实验结果表明靶向载药纳米颗粒和靶向载基因纳米颗粒能够选择性识别血管平滑肌细胞和血管内皮细胞,并被相应的血管细胞所摄取。将靶向载药纳米颗粒和靶向载基因纳米颗粒通过酶响应连接链共价键修饰到经过预处理的ZE21B镁合金表面,制备得到酶响应药物基因共负载聚合物纳米涂层。利用SEM、FTIR、XPS、光学轮廓仪、静态水接触角测试仪、纳米划痕测试仪对涂层的物理化学性质进行了系统表征。电化学实验与失重实验结果表明ZE21B合金表面酶响应药物基因共负载聚合物纳米涂层提高了 ZE21B合金的耐腐蚀性。溶血率实验、血小板粘附实验、全血实验、纤维蛋白原粘附和变性实验证明了经纳米涂层改性后的镁合金具有优异的血液相容性。血管平滑肌细胞和血管内皮细胞体外实验结果证明ZE21B表面酶响应药物基因共负载聚合物纳米涂层可显著抑制平滑肌细胞的粘附、增殖、迁移,同时加快内皮化进程;而且在内皮细胞和平滑肌细胞共培养实验中,内皮细胞在纳米涂层改性ZE21B表面显示出明显的竞争性生长优势。本论文所研究的酶响应药物基因共负载聚合物纳米涂层为新型可降解镁合金血管支架的的构建提供了一种新策略,对心血管疾病的治疗具有重要意义。

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