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苏云金杆菌cry1Ab16基因的克隆和表达

摘要分子伴侣P21zb能激发苏云金杆菌(Bacillusthuringiensis,简称Bt)晶体缺陷型菌株4Q7的沉默杀虫晶体蛋白(InsecticidalCrystalProtein,简称ICP)基因表达,形成130kDa的大菱形晶体.该研究通过对已知cry1类基因以及已发表的cry1Ab16序列进行分析,分别设计了两对引物PP2和P1-Ab,首次从苏云金杆菌以色列亚种(subsp.israelensis)晶体缺陷型菌析4Q7中扩增到cry1Ab16的全长基因,并克隆到pGEM-TEasy载体上.经SDS-PAGE和Western-blot检测,发现转化菌株M15(pQCT)能正确表达cry1Ab16蛋白,其分子量约为130kDa,但此蛋白不稳定,会降解成67kDa的蛋白.对表达的cry1Ab16蛋白进行涂布法生物测定,对三龄小菜蛾(Plutellaxylostella)的LC<,50>为258.3μg/ml对其他夜蛾科害虫的生长发育也有明显的抑制作用.另外,还对分子伴侣P21zb对Bt以色列亚种Bti/4Q7中晶体蛋白的形成及产量的影响等作用作了初步研究.

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