检索历史 清除

摘要宫颈癌是我国女性健康面临的一大挑战，其在妇科恶性肿瘤中的发病率位居前列。其主要病因是由于高危型人乳头瘤病毒(humanpapillomavirus,HPV)持续感染所致。HPV是一种常见的病毒，主要通过性接触传播，有多种亚型，其中高危型与宫颈癌的发生密切相关。尽管绝大多数育龄期女性在感染HPV病毒后，依靠自身的免疫系统可以自行清除病毒，不会导致长期的健康问题，但仍有一小部分女性因各种原因，未能完全清除病毒。此类情况下，持续的HPV感染会导致宫颈细胞发生异常变化，进而发展为宫颈上皮内瘤变，如果不加以干预和治疗，部分患者的病变可能会进一步恶化，最终发展为宫颈癌。尽管HPV和宫颈脱落细胞学检测，可以筛出大部分患者，但更多患者做了阴道镜检查及活检，病理学无高级别上皮内病变，也有部分漏诊患者。临床上尚有小部分HPV阴性的宫颈癌患者。因此临床上需要开发新的分子标志物，以减少不必要的有创检查及过度治疗，同时减少漏诊，以指导临床诊疗。基因甲基化是指胞嘧啶C的5''碳原子通过甲基转移酶连接甲基基团，调控基因的转录活性。几乎所有的癌症都与基因甲基化异常有关。DNA甲基化因检测方法简单、质量可控的优势，近年来已被推荐作为宫颈癌分子诊断的新手段。本研究主要探讨了ZNF671、PAX1和FAM19A4DNA甲基化单独或者联合检测在宫颈癌筛查及分流中的作用。<br>　　目的:分别比较HPV检测和/或TCT与ZNF671、PAX1和FAM19A4DNA甲基化检测的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确率的差异，探讨新的筛查策略。<br>　　研究方法:收集2021年9月至2022年9月期间就诊于山东大学齐鲁医院妇科门诊，并接受阴道镜检查且需进行宫颈活检术的149例患者作为研究对象。这些患者在就诊时已经完成了HPV检测和液基细胞学检查(TCT)，这些检测结果将作为研究的基础数据。在此基础上，进一步对这149例患者进行ZNF671、PAX1和FAM19A4三种基因的DNA甲基化检测。在本研究中，首先收集患者废弃的液基细胞学检测剩余样本，通过DNA提取和甲基化特异性PCR等技术手段，分析ZNF671、PAX1和FAM19A4三种基因的甲基化状态。根据我院阴道镜下宫颈组织活检的病理学检查结果，将患者分为宫颈癌(cervicalcancer,CC)组(5例)、宫颈高级别病变(high-gradesquamousintraepitheliallesion,HSIL)组(73例)和宫颈低级别病变(low-gradesquamousintraepitheliallesion，LSIL)组(71例)。对照患者的宫颈活检病理结果，使用统计学分析患者基因甲基化组合的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、正确率以及受试者工作特征曲线(ReceiverOperatingCharacteristic,ROC)及曲线下面积(Areaunderthecurve，AUC)。在统计分析中，分类数据以率表示。采用Pearsonx2检验或Fisher精确概率法进行多组间数据的比较及四格表数据的分析。统计分析结果表明，当P值小于0.05时，差异具有统计学显著性。<br>　　结果:<br>　　1.在149例研究对象中，31～40岁患者最多，诊断为LS1L/HSIL/CC的人数最多，且HSIL占比高于LSIL。<br>　　2.三基因联合甲基化检测对于HSIL的诊断准确率达74.5％，其诊断效能高于三种单个基因或其中任意两个基因组合。<br>　　3.HPV检测的ROC曲线下面积为0.579,TCT检查的ROC曲线下面积是0.613,三基因联合甲基化检测的ROC曲线下面积为0.752,三基因联合甲基化检测诊断HSIL的AUC最大。<br>　　4.HPV联合甲基化的ROC曲线下面积为0.759,TCT联合甲基化的AUC是0.720,TCT联合HPV检测的AUC是0.684,TCT+HPV检测+甲基化检测的ROC曲线下面积为0.727,HPV联合三基因甲基化检测诊断HSIL的AUC最大。<br>　　5.三基因甲基化检测在HPV16和或18阳性患者中诊断HSIL的ROC曲线下面积为0.811，远大于TCT检查的AUC。<br>　　6.三基因甲基化检测与TCT相比，在非HPV16/18阳性患者中诊断HSIL的准确率明显高于TCT的准确率，但灵敏度和阴性预测值TCT则呈现出更好的优势。<br>　　7.在TCT为ASCUS患者中甲基化检测预测HSIL较HPV具有更高的特异性和阳性预测值，三基因甲基化的准确率明显高于HPV的准确率，表现为84.4％vs48.9％,但灵敏度和阴性预测值则HPV呈现出更好的优势。<br>　　结论:<br>　　1.PAX1、FAM19A4、ZNF671三基因联合甲基化检测可用于低级别宫颈上皮内病变与高级别宫颈上皮内病变之间的差异的识别。<br>　　2.HPV与三基因甲基化检测联合诊断HSIL的效果优于传统TCT联合HPV的检测，为宫颈癌筛查提供新的策略。<br>　　3.三基因甲基化检测对于HPV16/18阳性患者具有分流诊疗的作用，对TCT为ASCUS患者具有分流的作用，可提高筛查的准确性。