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摘要糖尿病肾病（diabetickidneydisease,DKD）是糖尿病最常见血管并发症，也是导致终末期肾病（end-stagerenaldisease，ESRD）的重要原因。流行病统计学数据指出，糖尿病肾病已超越肾小球肾炎，成为我国慢性肾脏病（chronickidneydisease,CKD）的首要病因。然而，DKD的发病机制十分复杂，目前尚无令人满意的防治策略。足细胞（podocyte）,即肾小囊脏层上皮细胞，是构成肾小球滤过屏障的关键组成部分。足细胞的损伤及数量的减少是DKD最重要的早期事件，也是导致DKD患者蛋白尿产生及肾小球硬化的主要原因。虽然大量的研究表明，糖尿病肾病条件下足细胞损伤与氧化应激、高血糖、炎性反应有关，然而针对这些因素所采取的治疗策略对阻止糖尿病肾病的进展收效并不令人满意。因此，进一步探索DKD足细胞损伤的分子机制，对于寻求新的有效治疗策略，具有重要意义。<br>　　自“脂质肾毒性（lipidnephrotoxicity）学说”提出以来，脂质代谢紊乱在包括糖尿病肾病在内的慢性肾脏疾病中的作用受到越来越广泛的关注，当前已经成为该领域的研究热点。在肾脏实质细胞中，足细胞对脂质积累尤为敏感，而细胞中脂质的过度积累会导致细胞功能障碍，其定义为脂毒性，这是一种以线粒体氧化应激、细胞骨架重排、胰岛素抵抗和炎症反应为特征的现象，最终可导致足细胞肥大、脱落和死亡。研究表明,足细胞脂质代谢紊乱与各种蛋白尿性肾脏疾病密切相关，同时也是导致糖尿病肾病发生和发展的关键因素。因此，深入研究糖尿病肾病条件下足细胞的脂毒性损伤机制，并在此基础上寻求新的干预靶点，具有重要临床价值。<br>　　卷曲螺旋结构域蛋白（coiled-coildomain-containingproteins，CCDC）与多种生理和病理过程有关，其分子中特有的卷曲螺旋基序使之具有多种生物学功能。CCDC92是CCDC家族的一个新成员，近年来多项临床研究表明，CCDC92是冠心病和2型糖尿病共同的风险基因，且该基因的遗传突变与脂质代谢和肾功能障碍有关，提示我们CCDC92极有可能成为研究糖尿病及其并发症的新靶标。然而，目前CCDC92在肾脏中的功能和信号转导途径尚无报道。因此，深入探究CCDC92在DKD足细胞损伤中的分子机制，对于揭示CCDC蛋白新的生物学功能、寻找有效的DKD防治策略，具有重要的理论意义和潜在的临床应用前景。<br>　　本研究以CCDC92为中心，通过对不同病理学分型的DKD患者肾活检切片进行免疫染色，以分析其CCDC92的表达水平与肾脏损伤程度和脂质沉积的关系;通过在CCDC92足细胞特异性缺失的背景下建立两种类型的糖尿病肾病小鼠模型（db/db和HFD/STZ）,以阐明CCDC92在足细胞损伤中的作用;通过脂质组学、蛋白组学及相关生物信息学分析等方法，以探究CCDC92参与调控足细胞胆固醇稳态的作用机制，得到以下三个方面主要结论:<br>　　1.CCDC92在糖尿病肾病的足细胞中表达升高:使用免疫染色和Westernblot等方法，并结合DKD患者临床病例数据分析，发现CCDC92在DKD患者和两种糖尿病小鼠模型（db/db和HFD/STZ）的足细胞中显著升高，且肾小球CCDC92表达量与DKD患者血肌酐呈正相关，与肾小球滤过率（glomerularfiltrationrate，GFR）呈负相关，表明CCDC92参与了糖尿病条件下的足细胞损伤，提示CCDC92可能是足细胞损伤的潜在生物标志物。<br>　　2.CCDC92促进糖尿病肾病中的足细胞损伤:采用Cre-Loxp重组系统构建足细胞特异性CCDC92敲除（Cre+/Ccdc92fl/fl）小鼠，利用足细胞特异性腺相关病毒（adeno-associatedvirus,AAV）构建足细胞CCDC92过表达（pAV-Nphs1-Ccdc92）小鼠，建立糖尿病肾病小鼠模型，通过形态学实验、油红O染色、尼罗红染色和脂质组学分析等方法，证实足细胞CCDC92缺失可显著改善糖尿病肾病足细胞中的脂质沉积和足细胞损伤，而过表达CCDC92则进一步加重糖尿病肾病足细胞脂毒性损伤，提示CCDC92是足细胞脂质稳态的新型调控分子。<br>　　3.CCDC92通过调控PA28α-蛋白酶体通路,促进ABCA1介导的胆固醇稳态失衡:利用足细胞特异性腺相关病毒（pAV-Nphs1-shAbca1）在足细胞CCDC92缺失背景下建立足细胞ABCA1敲除的DKD模型，证实ABCA1是连接CCDC92和足细胞损伤的关键分子，并利用STRING（searchtoolfortheretrievalofinteractinggenes）分析、蛋白组学分析（tandemmasstagsproteomicsanalysis）和免疫共沉淀（co-immunoprecipitation，Co-IP）等方法，揭示了CCDC92通过结合蛋白酶体激活剂PA28α,从而调控PA28α与蛋白酶体核心亚基的结合，促进蛋白酶体活性并加速ABCA1降解，引起胆固醇稳态失衡，最终导致足细胞损伤。<br>　　综上所述，本研究通过临床样本、动物模型和体外实验，首次发现CCDC92在DKD足细胞中表达上调，并与DKD的进展密切相关。首次揭示了CCDC92可以作为足细胞脂质稳态调节剂的新型生物学功能。阐明了CCDC92通过调控蛋白酶体通路介导的胆固醇稳态失衡促进肾小球和足细胞损伤。本研究为充实、完善DKD的病理生理学机制增加了新的内容，为延缓DKD的进展提出了新的干预靶点，具有重要的理论意义和转化医学前景。