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摘要目的：<br>　　优化桔梗多糖的水提取工艺，并制备不同醇沉部位的桔梗多糖。分析桔梗主要成分桔梗多糖对桔梗皂苷溶解度的影响，研究其增溶机制。基于在体单向肠灌流模型，考察桔梗水提液中桔梗皂苷的肠吸收的影响，探究桔梗多糖、P-gp抑制剂及其与桔梗多糖联用后对桔梗皂苷肠吸收的作用，为揭示中药成分协同作用提供理论基础，为阐明中药整体性思想的科学内涵提供新思路。<br>　　方法：<br>　　1.桔梗多糖水提取工艺的优化:在单因素试验的基础上结合响应面法，以浸泡时间（A）,加液量（B）、提取时间（C）、提取次数（D)为自变量，多糖提取率为响应值，对桔梗多糖水提取工艺进行优化;以多糖含量和蛋白残留率为指标，优选桔梗多糖的除蛋白方法，选择最佳除蛋白方法，制备不同醇沉部位多糖。通过DEAE-52离子交换色谱对50％醇沉部位多糖PGP-A进一步分离，并测定不同分离部位多糖的分子量。<br>　　2.桔梗多糖对桔梗皂苷溶解度的影响及机制初步探究:采用醇提法提取桔梗皂苷（platycosides extract,PE）,通过AB-8大孔吸附树脂纯化PE,并测定PE中桔梗总皂苷和桔梗皂苷D（Platycodin D,PD）的含量;以PD的含量为指标，采用HPLC测定PE饱和溶液浓度，比较桔梗总多糖和不同醇沉部位多糖对PE溶解度的影响，并分析多糖浓度对PE溶解度的影响。通过丁达尔效应、粒径与Zeta电位、扫描电镜、差示扫描量热法、红外光谱法、临界胶束浓度、测定分子量及单糖组成等方法分析PGP-A对PE增溶的机制。<br>　　3.PGP-A对PE肠吸收的影响:采用大鼠在体单向肠灌流模型，分别给予0.05、0.1 g/mL桔梗水提液、PE、PGP-A+PE（PE给药量相当于桔梗水提液），HPLC测定PD的含量，以表观吸收系数Peff、吸收速率常数Ka、累计吸收量、累计吸收百分率、单位面积每小时吸收量为指标，分析不同肠段中PGP-A对PE肠吸收的影响，测定PGP-A不同分离部位多糖（PGP-A-1、PGP-A-2和PGP-A-3）对PE在回肠吸收的影响;此外，以P-gp抑制剂维拉帕米为工具药，分别给药0.025、0.25 mol/L维拉帕米+PE、维拉帕米+PGP-A+PE，并与PE的肠吸收进行比较，考察P-gp抑制剂及其与PGP-A联用后对PE肠吸收的影响。<br>　　结果：<br>　　1.桔梗多糖水提取工艺的优化:桔梗多糖的最佳提取工艺为浸泡24 min,加液量20倍，提取67 min,提取2次，模型预测的桔梗多糖含量为65.52％,实际测定所得含量为65.44％。反复冻融法除蛋白后的总多糖含量高于Sevage法，蛋白质残留率低于Sevage法，因此选择反复冻融法为最佳除蛋白方法。桔梗各醇沉部位的产率为0.48％-35.94％，多糖含量为64.06％-68.43％。PGP-A通过DEAE-52离子交换色谱得到3个不同分离部位，0.05 mol/L NaCl洗脱部位PGP-A-1的分子量为3297.79 Da,0.3 mol/L NaCl 洗脱部位 PGP-A-2 的分子量为 14931.57 Da,0.4 mol/L NaCl 洗脱部位PGP-A-3的分子量为21409.33 Da。<br>　　2.桔梗多糖对PE溶解度的影响:PE中桔梗总皂苷的含量为42.69％,PD的含量为3.34％。PE的饱和溶液浓度为200 mg/mL,此浓度下PD的含量为6.5441 mg/mL。桔梗总多糖和各醇沉部位多糖都对PE都有增溶作用，其中PGP-D的增溶作用最强，其次为PGP-A,且当PGP-A浓度为50 mg/mL时，对PE的增溶作用最强。不同PGP-A分离部位多糖对PE无增溶作用。PGP-A增加PE溶解度的机制结果如下:丁达尔效应表明，PGP-A、PE、PGP-A+PE、桔梗水提液均可形成光亮的通路，具有胶束性质;扫描电镜结果表明PGP-A可与PE聚合形成球状聚集物;粒径与Zeta电位表明，与PGP-A和PE相比，二者混合物水溶液的粒径增加，且由两个不同纳米范围的峰变为一个;差示扫描量热法结果表明相较于物理混合物，二者混合溶液冻干粉的吸热峰温度升高，吸收能量增加;红外光谱结果表明PGP-A可与PE相互作用，与氢键有关的吸收峰发生位移，表明氢键参与形成聚合物;通过检测临界胶束浓度、分子量、单糖组成对PGP-A的性质进行分析，PGP-A的临界胶束浓度为0.325 mg/mL,分子量分布范围为2443.99 Da-911508 Da,单糖组成为半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸、半乳糖、葡萄糖、阿拉伯糖，摩尔比为17.4∶18.9∶36.7∶28.4∶34.8。<br>　　3.PGP-A对PE肠吸收的影响:PE、PGP-A+PE、桔梗水提液的肠吸收均随时间增加而吸收量增加;相比于PE,桔梗水提液在十二指肠、空肠、结肠等部位的吸收显著增加，PGP-A可显著增加PE组在空肠、回肠部位的吸收，且在回肠部位PGP-A的增加与桔梗水提液相比有极显著性差异。在回肠部位的研究中，与PGP-A不同分离部位相比，PGP-A增加PE肠吸收的效果最好。在加入P-gp抑制剂的研究中，维拉帕米对PE在十二指肠的肠吸收参数无影响，在空肠、回肠和结肠中，维拉帕米可增加PE的吸收;维拉帕米与PGP-A联用后，可增加PE在空肠和回肠部位的吸收，而不影响PE在卜二指肠和结肠的吸收;且在空肠与回肠部位，维拉帕米与PGP-A合用后PE的肠吸收与维拉帕米+PE组相比也有显著性差异。<br>　　结论：<br>　　桔梗多糖的最佳提取工艺为浸泡24 min,加液量20倍，提取时间67 min,提取次数为2次，反复冻融法为最佳除蛋白方法。PGP-A可与PE发生相互作用，形成球状微粒，能够增加PE的溶解度，提高热稳定性。PGP-A可促进PE在空肠与回肠部位的肠吸收，而不影响其在十二指肠与结肠的肠吸收，推测PGP-A促进PE在回肠的吸收是通过抑制P-gp的外排作用实现的，促进PE在空肠的吸收可能不仅通过抑制P-gp的外排作用。