换一批
换一批摘要该研究利用乙肝病毒(HBV)本身嗜肝性的特点,及基因治疗的原理,将其进行一定的改造,希望使之成为仅有嗜肝性而无持续复制性的一种新型的基因治疗载体,用于乙型肝炎基因治疗的研究.方法是通过插入突变破坏乙肝病毒X基因区,构建单克隆位点,插入抗病毒细胞因子基因,如IFN基因,再构建入哺乳动物细胞表达载体,同时构建无X基因破坏的双拷贝HBV表达载体做对照,初步转染肝癌细胞株,检测细胞培养上清液中HBVDNA,进行初步分析.实验结果:经酶切鉴定及PCR鉴定,成功构建了PCDNA3-ES-HBV2、PCDNA3-KN-F1F2、及PCDNA3-KN-FN-F1F2-IFN载体质粒;将前两种质粒初步转染Hep3B肝癌细胞株,检测到细胞上清液中HBVDNA的高表达,平均在10<'8>拷贝/ul水平,而对照转染PCDNA3质粒则低于10<'3>拷贝/ul,说明构建的质粒能够在Hep3B肝癌细胞株中产生包装病毒,可用于进一步的实验研究.
更多相关知识
- 浏览0
- 被引0
- 下载0
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
