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摘要背景与目的:<br>　　视神经脊髓炎谱系疾病(Neuromyelitis Optica Spectrum Disorders，NMOSD)是一种自身免疫性炎症性脱髓鞘疾病，主要表现为反复发作的脊髓炎和视神经炎，其发病机制主要是由水通道蛋白4抗体(aquaporin-4 immunoglobulin G antibodies,AQP4-IgG)介导的。既往研究多集中在B细胞上，然而针对B细胞的耗竭治疗并不能完全控制疾病复发与进展，说明还有其他新的治疗靶点有待发现。调节性T细胞(Regulatory Tcells,Treg)通过分泌白细胞介素-10等细胞因子，直接或间接抑制效应T细胞、B细胞，进而维持免疫耐受;辅助性T细胞17(Thelper 17 cells,Th17)可以通过分泌白细胞介素-17(Interleukin-17,IL-17)等细胞因子增强血脑屏障通透性，促进免疫细胞向中枢神经系统浸润，加重神经炎症反应。二者通过相互抑制或转化达到平衡，此平衡被打破与NMOSD疾病发生发展密切相关。特异性富含AT序列结合蛋白1(Special AT-rich sequence-binding protein 1,SATB1)是一种核蛋白，它作为一种重要的转录因子，与T细胞的发育、分化和功能密切相关。SATB1对Treg细胞的分化是必要的，但成熟Treg细胞过度表达SATB1会损害其抑制功能并促进促炎细胞因子的表达。此外，SATB1能够调节粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子等表达使Th17细胞发挥其致病性作用。然而SATB1对Treg/Th17平衡的影响及其在NMOSD中的作用有待探索。<br>　　因此本研究以SATB1及Treg/Th17的平衡为出发点，通过检测外周血CD4+T细胞中SATB1 mRNA及Treg、Th17关键转录因子叉头框蛋白P3(Forkhead box protein P3，FOXP3)、视黄酸相关孤儿受体γt(Retinoic acid receptor-related orphan receptor gamma t,RORγt)的mRNA表达水平，流式细胞术检测Treg和Th17细胞的比例，探讨这些分子和细胞在NMOSD中的变化及其与临床特征的关系，初步研究SATB1与Treg/Th17的平衡在NMOSD中的作用，进一步为NMOSD的免疫病理机制提供新的分子视角，为改善疾病预后、减缓残疾进展开辟新途径，探索新的治疗靶点。<br>　　方法:<br>　　1.收集2024年1月至2024年12月于我院神经内五科住院治疗的NMOSD患者临床资料，并采集其外周静脉血，根据纳排标准，最终筛选入组40例患者，急性期与缓解期分别20例，同时收集对照组为健康志愿者20例。<br>　　2.完成静脉血采集后，分离得到外周血单个核细胞。一方面，运用流式细胞术对三组样本中的Treg、Th17细胞所占比例进行测定与比较;另一方面，借助免疫磁珠分选法从三组样本中分离出外周血CD4+T细胞，再通过荧光定量逆转录聚合酶链反应(reverse transcription quantitative real-time polymerase chain reaction,RT-qPCR)技术，对三组CD4+T细胞中SATB1、FOXP3 和RORγt的mRNA表达水平进行检测和对比。<br>　　3.分析NMOSD疾病组SATB1 mRNA与FOXP3 mRNA、RORγt mRNA、FOXP3 mRNA/RORγt mRNA相对表达量之间的相关性及与Treg、Th17、Treg/Th17细胞相关性。<br>　　4.分析NMOSD疾病组SATB1 mRNA表达水平与扩展残疾状态量表(expanded disability status scale,EDSS)评分，年复发率(annual relapse rate,ARR)，影像学MRIT2病灶数相关性。<br>　　5.比较三组复合炎性指标情况，包括系统性炎症反应指数(Systemic Inflammation Response Index,SIRI)，中性粒细胞与淋巴细胞比值(Neutrophil-to-Lymphocyte Ratio,NLR)，泛免疫炎症值(Pan-Immune Inflammation Value,PIV)，系统性免疫炎症指数(Systemic Immune-Inflammation Index,SII)，并将三组SATB1 mRNA与该指标进行相关性的分析。<br>　　结果:<br>　　1.三组CD4+T细胞中SATB1 mRNA的相对表达量NMOSD急性期组均高于缓解期组、对照组(P＜0.01;P＜0.0001)，缓解期组高于健康对照组(P＜0.001)。<br>　　2.在三组CD4+T细胞中，FOXP3 mRNA相对表达量的检测结果显示:与对照组相比，NMOSD急性期组和缓解期组均显著降低(P值均＜0.0001);进一步组间比较表明，急性期组的表达量低于缓解期组(P＜0.05)。RORγt mRNA相对表达量急性期组较缓解期组升高(P＜0.01)，较健康对照者明显升高(P＜0.0001)，缓解期组表达水平高于健康对照组(P＜0.001)。三组FOXP3 mRNA/RORγt mRNA比值急性期、缓解期均低于对照组(P＜0.001;P＜0.001)，急性期明显低于缓解期组(P＜0.0001)。急性期组和缓解期组的FOXP3 mRNA与RORγt mRNA表达量均呈负性相关，急性期相关系数为r=-0.74,缓解期相关系数为r-=-0.45,差异具有统计学意义(P＜0.001;P＜0.05)。<br>　　3.三组Treg比例健康对照组显著高于NMOSD组，缓解期组和急性期组较对照组均下降(P＜0.0001;P＜0.01)，且急性期组较缓解期组降低(P＜0.01)。与之形成对比的是，Th17比例呈现反向变化趋势，急性期组较缓解期组和对照组均升高(P＜0.01;P＜0.0001)，缓解期组仍较对照组高(P＜0.05)。三组Treg/Th17比例急性期均低于缓解期组、对照组(P＜0.01;P＜0.0001)，缓解期组低于健康对照组(P＜0.01)，在疾病不同阶段均观察到Treg与Th17细胞比例的显著负向关联，其中急性期相关系数达-0.73(P＜0.001)，缓解期相关系数为-0.66(P＜0.05)。<br>　　4.NMOSD疾病组的SATB1 mRNA与FOXP3 mRNA表达量呈负性相关，急性期组相关系数为r=-0.92,差异具有统计学意义(P＜0.0001)，而缓解期组相关系数为r=-0.44，差异不具有统计学意义（P=0.05)。而两组SATB1 mRNA与RORγt mRNA表达量均呈正相关，急性期相关系数为r=0.91,缓解期相关系数为r=0.59,差异均具有统计学意义(P＜0.0001;P＜0.05)。SATB1 mRNA与FOXP3 mRNA/RORγt mRNA比值均呈负相关，急性期相关系数为r=-0.89,缓解期相关系数为r=-0.55，差异均具有统计学意义(P＜0.0001;P=0.0113)。<br>　　5.NMOSD疾病组SATB1 mRNA的表达水平与Treg细胞比例之间存在负相关，急性期组相关系数为r=-0.71,缓解期组相关系数为r=-0.71，差异均具有统计学意义(P＜0.001;P＜0.001)。而两组SATB1 mRNA与Th17细胞比例呈正相关，急性期相关系数为r=0.92,缓解期相关系数为r=0.88,差异均具有统计学意义(P＜0.0001;P＜0.0001)。两组NMOSD患者SATB1 mRNA相对表达量与Treg/Th17比值呈负相关，急性期相关系数为r=-0.79,缓解期相关系数为r=-0.86,差异均具有统计学意义(P＜0.0001;P＜0.0001)<br>　　6.NMOSD急性期组和缓解期组CD4+T细胞SATB1 mRNA相对表达量与EDSS评分呈正相关关系，急性期相关系数为r=0.51,缓解期相关系数为r=0.4,差异均具有统计学意义(P＜0.05;P＜0.05)。<br>　　7.NMOSD急性期组和缓解期组CD4+T细胞SATB1 mRNA相对表达量与MRI T2FLAIR病灶数无明显相关关系(r=0.14,P=0.589;r=0.04,P=0.859)。<br>　　8.NMOSD急性期组和缓解期组CD4+T细胞SATB1 mRNA相对表达量与ARR存在正相关，急性期相关系数为r=0.68,缓解期相关系数为r=0.59,差异均具有统计学意义(P＜0.05;P＜0.05)。<br>　　9.三组复合炎性指标对比，SIRI、NLR、SII急性期均高于缓解期及健康对照组(SIRI:P＜0.05,P＜0.001;NLR:P=0.007,P＜0.001;SII:P=0.015,P＜0.001)，缓解期高于健康对照组(SIRI:P=0.001;NLR:P=0.013;SII:P=0.001);PIV在急性期与缓解期之间的差异无统计学意义（P=0.057)，但急性期和缓解期的PIV值均高于健康对照组(均P＜0.001);所有入组样本外周血CD4+T细胞中SATB1 mRNA相对表达量与SIRI、NLR、PIV、SII均呈正相关关系，相关系数分别为 0.69、0.60、0.70、0.66,差异均具有统计学意义(P＜0.001;P＜0.001;P＜0.001;P＜0.001)。<br>　　结论:<br>　　1.SATB1可能与NMOSD疾病活动性密切相关，可作为评估NMOSD疾病活动度及复发风险的潜在标志物。<br>　　2.进一步证实Treg/Th17免疫失衡与NMOSD疾病有关，且其失衡程度与疾病活动性密切相关，为靶向Treg功能增强或Th17炎症抑制的精准免疫治疗提供了证据。<br>　　3.SATB1可能通过调控Treg/Th17平衡与NMOSD发病相关，靶向调控SATB1可能会影响疾病的发生，这为NMOSD免疫治疗提供新方向。