摘要该文以两尾转人生长激素基因红鲤F<,4>仔鱼为材料,采用经改进的质粒回收法对上述问题进行了研究,主要内容如下:1.从两尾转人生长激素基因红鲤F<,4>仔鱼个体(A和B)基因组中分别回收了上千个转植基因克隆,各随机取200个转植基因进行BamH Ⅰ和EcoRⅠ双酶切分析.2.构建每类转植基因的六种限制性内切酶BamHⅠ、HindⅢ、EcoRⅠ、PstⅠ、KpnⅠ和BglⅡ的酶切图谱.3.通过Southern杂交对转植基因在回收质粒上的位置进行了定位分析,并对三种回收到的变异型转植基因旁侧顺序进行了亚克隆和顺序测定.4.对转植基因回收方法进行了完善,对转植基因的世代传递和遗传稳定性进行了讨论,对转植基因所表现的多态性成因进行了分析.通过上述几个方面的研究结果和分析,首次较全面和细致地刻画了F<,4>转基因红鲤中转植基因的整合图景,发现了外源基因整合和世代传递过程中发生的变异现象并分析了成因,获得了转植基因整合位点旁侧宿主基因组顺序的资料,为下一步克隆全长新基因打下了基础.其结果有力地证实了建立稳定转基因动物品系的可能性,并有助于深入了解外源基因整合机制和世代传递规律.
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