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布洛芬立体拆分菌株的离子束诱变选育及拆分条件的优化

摘要通过改进前人的相关方法,建立了快速定性与定量检测布洛芬的方法,该方法快速、准确,优于药典法.从土壤中分离到的154个菌株中,根据罗丹明B的显色反应,26株具备不同程度水解布洛芬乙酯的能力;通过旋光度的测定筛选到能立体选择性水解布洛芬乙酯生成S-布洛芬的菌株有2株,其中代号为T<,2P>的菌株水解能力较强,S-布洛芬的产量较高.经Biolog系统鉴定,T<,2P>为Candida sorboxylosa.利用正交实验确定了菌株Candida sorboxylosa T<,2P>培养的最适条件.培养的最适温度为34℃,适宜的培养基组分为:酵母抽提物1.2﹪、吐温800.5﹪(v/w)、葡萄糖1.0﹪、蛋白胨0.6﹪、磷酸氢二钾0.1﹪.用低能离子束诱变的方法诱变菌株Candida sorboxylosa T<,2P>得到了几株布洛芬乙酯水解活性有所提高的突变株,有的突变株应用后可提高S-布洛芬的产量达20﹪以上;同时,也证明低能离子束诱变是一种有效的诱变方法.用菌株Candida sorboxylosa T<,2P>的培养物催化水解布洛芬乙酯所得产品的外观、熔点、旋光度、红外色谱和核磁共振色谱等各项检测指标与Sigma公司的标准品S-布洛芬基本一致,这表明该菌株具有应用于S-布洛芬生产的潜力.

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