换一批摘要该文通过PCR的方法从中国分离最早、生物学特性研究已很详尽的PRV代表毒株闽A株的基因组DNA中克隆了gE基因的表位抗原编码区片段与去信号肽片段,成功地完成了gE基因表位抗原编码区片段在Pichiapastoris酵母表达系统、杆状病毒Bac-to-Bac表达系统、原核表达系统中的表达以及gE基因去信号肽片段在Pichia pastoris酵母表达系统中的表达,比较了四种表达产物的抗原性,选择抗原性最好的gE基因表位抗原编码区片段P.pastoris酵母系统表达产物为抗原建立了PRV gE-ELISA检测方法.该文所克隆的PRV闽A株gE基因表位抗原编码区片段长564bp,编码一个由188个氨基酸组成的多肽,与国外代表毒株Rice株gE基因相应区段的核苷酸及氨基酸序列同源性分别为97.3﹪、94.7﹪;gE基因去信号肽片段长1 674bp,编码gE除去信号肽后的558个氨基酸,与Rice株gE基因的核苷酸及氨基酸序列同源性分别为97.5﹪和94.8﹪.gE基因表位抗原编码区片段与去信号肽片段的重组表达完成后,以四种表达产物制备抗原,与PRV标准阳性、标准阴性血清进行ELISA,计算同一抗原稀释度与血清稀释度下标准阳性血清与阴性血清反应OD<,450>值的比值与差值.
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