摘要目的:建立一种骨髓基质细胞(BMSCs)体外培养,定向诱导分化为成骨细胞的方法,并探讨其体外成骨能力. 方法:冲洗法获取SD大鼠骨髓,使用percoll分离液密度梯度离心分离提纯BMSCs,进行体外培养,保留贴壁细胞传代,在培养液中添加地塞米松(Dex)、维生素C(VitC)、β-甘油磷酸钠(β-GP),观察细胞生长状态,通过碱性磷酸酶(ALP)染色和Von Kossa染色观察其向成骨细胞分化及体外成骨情况. 结果:BMSCs呈成纤维细胞样生长,增殖能力强,生长迅速.诱导条件下细胞的ALP活性明显增高,并且出现钙化结节. 结论:使用该实验方法,获得的BMSCs增殖能力强,在地塞米松、维生素C和β-甘油磷酸钠联合诱导下可定向分化为类成骨细胞,成骨能力肯定,适合作为骨组织工程的种子细胞.
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