换一批
换一批摘要该研究采用PCR方法克隆了分别来自水稻和拟南芥的两个叶绿体导肽(Chlorplasttransit peptede,CTP)的编码序列.在适用于植物的双元转化载体pCAMBIA-1300基础上构建了分别由水稻和拟南芥CTP引导Bt蛋白定位于叶绿体的两个载体p13AOB和p13AAB和一个不含叶绿体导肽的对照载体p13AB.这三个载体均由来源于水稻的Act1启动子控制,该启动子带有可提高启动效率10倍以上的内含子.所用的Bt基因是经过密码子改造的Cry1Ac3,在植物中可被高效翻译.用这三个表达载体以基因枪法或农杆菌法转化台北309和石狩白毛两个水稻品种,经过潮霉素抗性筛选再生得到共87个独立的转基因植株.对所有植株的表型观察结果显示所有Bt蛋白由水稻或拟南芥导肽定位于叶绿体的转基因植株,其外观表型均与非转基因对照无明显区别;而转基因的石狩白毛品种中Bt蛋白不经导肽定位的转基因植株则株型矮小,叶片长宽比小;台北309品种中Bt蛋白不经导肽定位的转基因植株近40﹪有类似现象.
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