换一批摘要为研究COCH基因功能,探讨COCH基因突变引起听觉及前庭功能障碍的机理及COCH基因与梅尼埃病的关系,分三部分进行了实验性研究.实验(一)体外转录标记COCH基因的cRNA探针及sRNA探针,以原位杂交方法观察小鼠内耳COCH基因的表达分布,重点观察既往报道没有涉及,而在膜迷路积水形成中具有重要作用的内淋巴囊的COCH基因的表达.实验(二)采用新生小鼠耳蜗螺旋韧带外植的方法,培养分离耳蜗螺旋韧带成纤维细胞,免疫细胞化学、酶细胞化学及培养细胞原位透射电镜技术观察、鉴别成纤维细胞的类型.RT-PCR、Western blot检测培养细胞COCH、POU3F4/brn4基因表达,建立观察COCH、POU3F4/brn4基因体外表达的细胞模型.实验(三)引入两种干预因素,观察体外培养的耳蜗螺旋韧带Ⅰ型成纤维细胞COCH、POU3F4/brn4基因的表达变化.
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