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核基质结合区(MARs)的功能研究及其在提高芪合酶表达中的应用

摘要核基质结合区MARs(Matrix Attachment Regions)是真核生物基因组DNA序列中可特异地与核基质结合的区域.它与核基质及其结合蛋白一道,参与了包括染色体构建、DNA复制及基因的表达调控等生命活动,有极其重要的生物学功能.该研究即着重探讨了MARs序列在转基因植物和转基因真菌中的功能及应用.1.分别从烟草(Nicotiana tabacum)、酵母(Saccharomyces cerevisiae)及菜豆(Phaseolus uvlgaris)基因组中克隆了长度为984bp、822bp及782bp的MARs片段.2.将三种MARs序列分别构建在β-葡萄糖苷酶基因uidA及除草剂抗性基因bar的两侧,用带有MARs-uidA-bar-MARs结构的双元表达载体通过农杆菌介导转化烟草.3.将三种MARs序列分别构建在三磷酸甘油醛脱氢酶(GPD)启动子驱动的β-葡萄糖苷酶基因uidA及除草剂抗性基因bar的两侧,用带有MARs-uidA-bar-MARs结构的载体通过电击方法转化灵芝的原生质体,并再生得到稳定整合的转基因灵芝.4.植物次级代谢物白藜芦醇(resveratrol)近年来被证明对人体具很好的保健功能,而芪合酶(stilbene synthase)是其生物合成中的关键酶.

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