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摘要泡沫病毒在分类上属于逆转录病毒科的泡沫病毒属,由于此类病毒感染某些培养细胞后能形成特异性的泡沫状合胞体,因此以泡沫病毒命名了这类病毒.在建立了人泡沫病毒感染的检测细胞系BHK-HFVLTR-EGFP后,我们利用它对人泡沫病毒进行了两个方面的特性研究.第一是以往报道较多的,人泡沫病毒感染与甲状腺疾病的相关性.将6例De Quervaina(亚急性甲状腺炎)病人和11例Graves(突眼甲状腺肿)病人的外周血淋巴细胞分离出来与BHK-HFVLTR-EGFP细胞共培养,在持续一个月的培养时间里始终未观察到泡沫状合胞体细胞的出现也没有细胞发绿色荧光,表明不存在HFV的增殖感染.Souther杂交和PCR检测也都没有能检测到相应的HFV序列,表明不存在HFV的整合感染,证实了细胞培养的结果,说明该地区Graves和De Quervaina's甲状腺疾病的产生应与HFV无直接关系.第二是人泡沫病毒在体外的稳定性.应用反复冻融和不同温度处理的HFV去感染BHK-HFVLTR-EGFP检测细胞,流式细胞仪检测发荧光的细胞,确定HFV感染性的变化.发现随着冻融次数的增加和处理温度的升高,病毒感染力急剧下降.其中HFV对前十次的反复冻融明显后续冻融敏感,分析原因可能为存在二种类型的病毒粒子,其中一种较另外一种脆弱;同时也发现随着处理温度的提高和时间的延长,病毒感染力急剧下降.另一方明,我们也进行了人泡沫病毒复制缺陷型载体的构建,在人泡沫病毒原病毒全长克隆pHRSV13的基础上,缺失病毒基因组的env基因和bel基因,保留其内部启动子IP构建了一个表达标记基因neo和报道基因gfp的重组人泡沫病毒载体质粒pGPSNI-GFP.同时在pHRSV13的基础上缺失突变gag和pol基因,并且用SV40 polyA加尾信号替换人泡沫病毒的3'LTR构建辅助质粒pΔGP.两种质粒共转染BHK-21细胞后,得到复制缺陷型的重组病毒粒子GPSNI-GFP.该病毒粒子可以感染多种细胞,将外源基因转移到细胞中实现表达,并可以将携带的外源基因整合于细胞染色体DNA上实现长期稳定表达.并且研究还发现该病毒载体对不同类型细胞的转基因效率是不同的,其中对成纤维细胞的转基因效率高于上皮细胞.