摘要目的:观察兴奋性氨基酸对体外培养皮层神经细胞的损伤、NMDA-1受体和突触生长素的影响及亚低温状态下的表达情况,为亚低温抑制兴奋毒性、保护神经细胞提供了进一步的理论依据.方法:在建立体外培养皮层神经元的兴奋性损伤模型基础上,应用倒置相差显微镜下细胞计数和生化检测LDH,细胞免疫组化法观察NMDAR-1和突触生长素的表达,以进一步验证兴奋性氨基酸对皮层神经细胞损伤及亚低温的保护作用.结果:1、不同浓度谷氨酸(Glu)兴奋性损伤皮层神经元后,(1)随谷氨酸浓度的增加,培养的皮层神经元细胞存活数明显减少,LDH漏出增加,细胞损伤加重.(2)谷氨酸组NMDA-1阳性细胞的光密度均高于对照组(P<0.05),并随谷氨酸浓度增加而增加;对照组表达的最少,200umol/L常温谷氨酸组表达的数量最多,说明NMDA-1的表达数量随细胞损伤程度的增加而增加.(3)谷氨酸组突触生长素(synaptophysin)的光密度均低于对照组(P<0.05),并随谷氨酸浓度增加而降低;常温对照组表达的最多,200umol/L谷氨酸组表达的数量最少.说明突触生长素的表达数量随细胞损伤程度的增加而减少.2、亚低温组皮层神经元LDH释放量、NMDA-1光密度均低于常温相对应组.亚低温状态下细胞存活数、突触生长素的光密度均高于常温相对应组(P<0.01),说明亚低温可减轻兴奋性毒性对皮层神经元的损伤.
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