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大鼠大脑微血管形态构筑的定量研究

摘要目的:定量研究大鼠大脑部分区域的微血管构筑的特征;为临床脑血管疾患诊断、以及病理生理学研究提供计量形态学资料和参数.方法:选取健康Wistar大鼠20只,体重180~250g.10%乌拉坦(1g/kg)腹腔内麻醉,经升主动脉插管,温生理盐水60~80ml快速冲洗,继以2%戊二醛、2%的多聚甲醛、2%的单宁酸混合媒染固定液200~250ml灌注,固定2~4小时后取出大脑.按区分割保存,准备连续冰冻切片.取10例脑标本,按标记好的大脑不同区域(额、顶、枕区),分别做连续冠状切片;另取10例分别按不同分区作矢状切片,每个大脑区域取5张切片,每个切片厚50μm,用蒸馏水漂洗2次后,置于2%氯化铁溶液中呈色20分钟,再经蒸馏水漂洗3次,梯度酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封片.应用标定好的目镜测微器按体视学方法,测量大脑皮质相关区域微血管直径;每张切片不同区域在100倍显微镜下,各选3个视野计数微血管断面轮廓数,然后取平均值作为微血管密度(MVD)值;用CMIAS图像分析系统测定微血管面积比(MVA);每只大鼠同一部位的5张切片MVA、MVD结果取平均值作为这只大鼠的MVA、MVD值.并作显微摄影.所得数据在SPSS11.0上进行统计学处理,分别作方差分析和秩和检验.

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