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摘要重症肌无力(Myasthenia gravis,MG)主要是由乙酰胆碱受体抗体(AChRAb)介导的、细胞免疫依赖性、补体和多种细胞因子参与的针对神经-肌肉接头(NMJ)处突触后膜上乙酰胆碱受体(AChR)的自身免疫性疾病,主要靶器官是骨骼肌.但是,临床上仍有15％以上的MG患者血清中无法检测到AChR抗体(SNMG),以及AChR抗体效价的高低也与疾病的严重程度和预后无绝对的相关性.另外,血浆交换治疗对SNMG患者同样具有良好的治疗效果,将SNMG患者的血清给实验动物注射后同样可引起实验性自身免疫性MG(EAMG).这些结果均提示,MG确切的免疫病因机制实际上至今仍不完全清楚.病人体内必定还存在针对靶器官其它未知抗原表位的自身抗体.由T辅助淋巴细胞分泌的细胞因子通过影响细胞调控的免疫反应及自身抗体的产生可参与MG的发病机制.P9基因是近年我们通过DD-PCR技术筛选获得的一个MG相关新基因,经同源性对比分析,它与己知基因的同源性不足1％,主要在骨骼肌、胸腺等MG的靶器官组织中表达,并且在伴胸腺增生及胸腺瘤MG患者骨骼肌中mRNA的表达水平明显高于对照组患者.该基因全长3442bp,编码709个氨基酸.考虑到该基因较大,如果对其全长基因进行表达和研究,技术要求高,难度很大.因此,我们通过InterPro等著名蛋白数据库对P9基因进行了检索分析,发现它包含了TRAF型锌指结构域(简称P9-ZFD)和F-box二个功能域,以及三个可能的跨膜区.其中的P9-ZFD功能域是一个具有重要功能的衔接子蛋白,它通过在细胞膜和胞浆部位的表达,其TRAF2区作为TNF诱导产生的细胞膜多蛋白受体复合物(MPRC)的一部分,可偶联与TNF-TNFR1信号传导通路有关的细胞因子,影响T细胞介导的免疫反应及间接地调节自身抗体的产生.因此,它与MG的病因机制可能具有十分重要的关系.于是,我们选择了P9-ZFD这个重要的基因功能段,运用基因工程技术对其进行克隆、表达和纯化,并制备和提纯相应的多克隆抗体,来进一步研究1)MG和非MG患者骨骼肌组织中P9-ZFD蛋白的原位表达及其亚细胞结构定位;2)不同人体组织中P9-ZFD蛋白的表达水平,以及不同临床和病理类型MG、非MG和其它肌肉疾病(OMD)患者骨骼肌组织中P9-ZFD蛋白表达的差异性,以求阐明P9-ZFD蛋白在MG自身免疫病理过程中的作用机制.