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摘要我们首先克隆得到小鼠的Bex1基因,检测小鼠不同发育时期胚胎中Bex1 mRNA的表达变化情况,发现它在成年鼠脑中的表达量大大低于小鼠胚胎,说明它确实与小鼠脑的发育相关.用小鼠胚胎进行的整体原位杂交显示,Bex1在神经系统高表达,尤其在前脑和侧脑.用成年小鼠脑切片进行的原位杂交发现,Bex1在神经元中特异性表达,且在海马中的表达量高于其它部位.因信息学分析未发现已知的功能结构域,为寻找人BEX1基因的功能线索,我们以BEX1全长为"诱饵"蛋白,通过酵母双杂交技术筛选人胎脑cDNA文库,寻找与之相互作用的蛋白.结果发现,人染色质重塑复合体SWI/SNF的核心成员hSNF5能与BEX1相互作用.为了进一步验证这种相互作用,我们进行了GST—Pull down试验.在大肠杆菌中表达了GST-BEX1融合蛋白,用Sepharose 4B进行亲和层析纯化.同时将hSNF5构建入真核表达载体pcDNA4/myc,转染HeLa细胞后,获得真核表达的带myc标签的hSNF5蛋白.GST-Pull down结果证实,BEX1和hSNF5能在体外结合.此外,免疫荧光共定位试验显示,两者在细胞中的分析有重叠区域,均在细胞核中有分布.以上三种实验结果基本证实两者之间确实存在相互作用.为了研究BEX1可能具有的功能,我们进行了细胞周期试验.观察到SNF5单独转染G401细胞时能轻微促进细胞的增殖,BEX1与hSNF5共同转染后,促进效果更为显著.由于BEX1本身并未发现能与DNA直接结合,而hSNF5所在的染色质重塑合体单独存在时作用没有特异性,我们推测,BEX1可能作为接头分子,介导了其它蛋白与hSNF5的作用,导致控制细胞周期相关基因的转录激活或抑制.该实验室通过酵母双杂交方法同时还筛选到BEX1的另一个相互作用蛋白LMO2.为了探讨BEX1、SNF5和LMO2三者之间的关系,利用c-kit基因的启动子区构建荧光素酶报告基因,对BEX1、LMO2和hSNF5三者之间的相互关系进行了初步的研究.