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摘要在豌豆根瘤菌(Rhizobium leguminousarum bv.viciae)的共生大质粒pRLJI上已鉴定了13个结瘤基因,分属5个操纵子(nodO,nodMNT,nodFEL,nodD和nodABCIJ).其中nodD是控制其它所有结瘤基因操纵子转录的重要调节基因,其产物NodD蛋白特异地结合于结瘤基因启动子并在植物分泌的诱导剂类黄酮存在时激活结瘤基因表达.nodD的表达受其产物的负反馈调控(negative autoregulation).在研究NodD与结瘤基因启动子之间相互作用的过程中,该实验室发现了另一个新的蛋白因子(HurL)能够特异地结合结瘤基因启动子DNA并对其进行了分离纯化工作.体外实验结果表明,HurL蛋白在适当的浓度下,可刺激主要的结瘤调控基因nodD的体外转录,揭示其可能参与结瘤基因表达的调控.该文进一步确证了编码该蛋白的hurL基因为染色体基因,同时从豌豆根瘤菌染色体中克隆到 hurL基因区域的3.1kb大小的DNA片段并进行了测序.对hurL启动子在豌豆根瘤菌体内转录表达的研究发现hurL基因在根瘤菌体内的表达并不稳定,随着根瘤菌的生长时间而上下波动.利用插入卡那霉素抗性基因和同源重组手段,该文构建了豌豆根瘤菌的hurL基因突变株.通过对hurL突变株在不同条件下生长和存活的研究,发现豌豆根瘤菌hurL基因的突变导致根瘤菌的生长严重不良和对紫外线敏感性的提高.证明hurL基因为根瘤菌维持正常生长所必需并有可能参与对受紫外线损伤NDA的修复过程.通过测定NodD蛋白产量和结瘤基因-lacZ报告基因转录水平,发现hurL基因突变株中检测不到NodD蛋白并且nodD基因转录严重下降;nodA和nodF的表达变为即使在诱导剂存在时也不能够表达,而该实验室新近发现的px<,2>基因的表达则有一定程度的上升.