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壳聚糖亲和膜用于蛋白质溶液中内毒素的脱除

摘要内毒素有很强的生物效应,当它进入人体或动物体血液循环系统时,很低浓度的内毒素都会表现出很强的毒性.因为它的毒性,所以用于注射时即使很少量的内毒素都有必要去除.亲和膜分离技术,膜技术和亲和色谱的结合,与传统的多孔珠填充柱相比,有很多优点,特别是蛋白质的回收率和活性较高.当内毒素单体分子形成胶束或胶囊时,由于在膜孔中物质传递的限制,微滤吸附膜对去除十分有效.我们通过两种配基的比较,发现配基和内毒素之间同时有电荷相互作用和疏水相互作用.以聚偏氟乙烯中空纤维膜为基质材料,制备了用于去除内毒素的壳聚糖亲和膜.研究了该亲和膜在牛血清白蛋白溶液和溶菌酶溶液中去除内毒素的应用情况.考察了离子强度、pH值以及流速等对去除效果的影响,并分析了原因.PVDF中空纤维膜经碱处理后,交联上壳聚糖,成为壳聚糖亲和膜.其非特异性吸附减小,在溶液中性质稳定,亲水性显著提高.该亲和膜用于BSA溶液中内毒素去除时,离子强度可选择0.2~0.4,pH值选择5~7,温度影响不大,流速可根据要求选择.在合适的条件下,内毒素去除率可在85%以上,而蛋白的回收率可在95%以上.该亲和膜用于溶菌酶溶液中内毒素去除时,离子强度可选择0.2左右,pH值选择在11左右.那样也可以将内毒素浓度降到0.04Eu/mL以下.尝试用L-赖氨酸单体分子作为配基,发现效果不理想.

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