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均匀双轴机械刺激对大鼠成骨细胞COX-2表达的影响

摘要环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)在受到机械刺激后表达增高,为了探讨其在机械刺激促进成骨中发挥的作用,该实验模拟体内牵引成骨的模型,采用了一种能产生均匀双轴机械刺激的新模型,通过对SD大鼠乳鼠的成骨细胞给予不同时间(2h,4h,8h)和不同强度(20,000microstrain,100,000microstrain,200,000microstrain)的机械刺激,观察COX-2的表达的改变并对其机制进行了探讨.利用连续植快法获得成骨细胞,并采用改良Gomori氏钙钴法显示碱性磷酸酶,骨钙素和骨形态生成蛋白的免疫细胞化学等方法对成骨细胞进行鉴定;利用激光共聚焦技术,免疫细胞化学法和Western blot对均匀双轴机械刺激在不同时间和强度作用下COX-2的表达进行了检测;通过流式细胞术检测均匀双轴机械刺激后成骨细胞的增殖和细胞周期的改变.激光共聚焦和免疫细胞化学显示,均匀双轴机械刺激后COX-2主要分布于胞质,在核周聚集明显;Western blot检测均匀双轴机械刺激2h时,成骨细胞COX-2的表达变化不明显,刺激4h和8h后表达均显著增高;随刺激强度增加,4h组的COX-2表达逐渐增多,而8h组的表达出现降低,对照组无明显改变.均匀双轴机械刺激在一定刺激时间(4h)和强度(20,000~200,000microstrain)时不仅可以促进SD大鼠乳鼠成骨细胞COX-2的表达,还可以促进成骨细胞的增殖.

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