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摘要该研究对粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomycespombe)中一个新的snoRNA--mgU2-3/11 snoRNA(methylation guidefor U2snRNA U3and U11)进行了鉴定,并对其指导U2 snRNA2'-O-核糖甲基化修饰的功能进行了证明.为U2 snRNA的2'-O-核糖甲基化修饰可由snoRNA指导的观点提供了酵母遗传学上的证据.为粟酒裂殖酵母中U2 snRNA的核糖甲基化修饰机制及其生物学意义的进一步阐明提供了重要基础.主要结果如下:1.通过计算机搜索并结合Northern杂交和逆转录实验分析,在粟酒裂殖酵母中发现并鉴定了一个新的snoRNA--mgU2-3/11 snoRNA.它在细胞中稳定存在,大小为161nt,包含box C/D、box C'/D'结构元件以及长4nt的末端反向重复序列,在其box D'和box D上游分别存在两段长14nt和10nt的与U2 snRNA前体互补的反义序列,理论推测它具有指导U2 snRNA中U3和U11两个位点2'-O-核糖甲基化的功能.这是首次在酵母中发现具有指导U2 snRNA 2'-O-核糖甲基化修饰的snoRNA,为酵母中指导snRNA核糖甲基化修饰的box C/D类snoRNA增加了新成员,为snoRNA进一步的功能研究及U2 snRNA核糖甲基化修饰机制的研究提供了良好的遗传分析体系.2.利用同源重组技术,成功构建了粟酒裂殖酵母mgU2-3/11 snoRNA基因缺失株.并用低浓度dNTP引物延伸法证明了粟酒裂殖酵母mgU2-3/11 snoRNA指导U2 snRNA中Um3和Um11两个位点2'-O-核糖甲基化修饰的形成.这是世界上首次用酵母遗传缺失的方法证明了box C/D snoRNA具有指导U2 snRNA 2'-O-核糖甲基化修饰的功能,而mgU2-3/11 snoRNA还是已知的同时指导U2 snRNA中两个位点2'-O-核糖甲基化修饰的第一个box C/D snoRNA分子.3.采用低浓度dNTP引物延伸法,发现和鉴定了粟酒裂殖酵母U2 snRNA中的一个2'-O-核糖甲基化修饰新位点--Um3.同时指出粟酒裂殖酵母U2 snRNA中U9位的2'-O-核糖甲基化修饰并不存在.4.通过对粟酒裂殖酵母mgU2-3/11 snoRNA基因缺失株及野生株的温度转换生理实验分析,发现mgU2-3/11 snoRNA分子的缺失,虽然导致粟酒裂殖酵母U2snRNA中Um3及Um11的缺失,但却对细胞中U2 snRNA的稳定表达与代谢无明显影响,对粟酒裂殖酵母细胞的生长表型及速率也无明显影响,mgU2-3/11snoRNA因而可能是粟酒裂殖酵母生长的非必需分子.