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重组腺病毒体外转染内皮细胞的研究

摘要该研究拟用重组腺病毒体外转染内皮细胞,为进一步动物体内肿瘤血管形成靶向基因治疗奠定基础.研究分五个实验进行.与正常的大鼠内皮细胞相比,转染了SV40肿瘤抗原后的大鼠内皮细胞增殖速度增快、生命期延长、并且对血清和生长因子依赖性降低,但细胞未发生恶性转化仍保持正常内皮细胞部分生物学特性.转染后的鼠内皮细胞增殖速度加快可能受CyclinD1、P53和P21的表达调控.该研究建立的SV40转染后内皮细胞可作为体外研究血管形成的稳定内皮细胞株.细菌内同源重组法是一种高效、简便、快捷的重组腺病毒载体制备方法,制备的腺病毒在体外可以高效转染鼠内皮细胞,所转染外源基因可以持续表达较长时间.腺病毒作为抗肿瘤血管形成靶向基因治疗的载体具有可行性.脐血中存在大量的血管内皮祖细胞,获取的细胞具有与成人外周血中的内皮祖细胞相似的体外生物学特征,可进一步用于体内实验.以上实验结果为内皮细胞为载体的体内抗肿瘤血管形成靶向基因治疗奠定了基础.

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