换一批
换一批摘要该论文直接目的是分离可被Cbfa1诱导的新基因,长远目标在于找到与骨骼细胞分化相关转录因子.该文以具有早期骨细胞特征MLO-Y4(Murine Long Bone Osteocyte-Y4)细胞为研究对象,将Cbfa1基因转染到细胞内后,用抑制性消减杂交(SSH)方法进行新基因分离,成功构建了Cbfa1诱导下表达基因片段文库.从文库中随机选出的83个阳性克隆中,含有Cbfa1基因片段克隆24个,含有其它已知基因片段克隆19个,含有未知基因片段克隆40个,占克隆总数的67.8﹪.实验用VirtualNorthern blot方法证明了其中一个没有同源序列的未知基因是Cbfa1诱导下表达的新基因.因为,在Cbfa1诱导的已知基因中有Osx存在,所以,实验进一步以RT-PCR法证实在MLO-Y4细胞中Cbfa1可以诱导Osx表达.该实验同时用RT-PCR法在另两种成骨细胞MC3T3-E1、U2OS中也检测到了Cbfa1诱导Osx的表达.
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