换一批摘要目的:应用体外培养的腰椎髓核软骨细胞,在细胞分子水平观察PDGF-BB对IL-1 β诱导的髓核软骨细胞凋亡的保护作用,探讨PDGF-BB在阻止或延缓腰椎间盘退行性改变的机制.方法:显微解剖下分离30日龄SD大鼠的腰椎髓核软骨细胞,体外单层培养并分组:(1)对照组,仅加15﹪小牛血清.(2)IL-1 β组,加入100ng/ml IL-1 β,促进培养细胞凋亡,制作凋亡模型.(3)IL-1 β+PDGF-组,加入100ng/ml IL-1 β同时加入500ng/ml PDGF-BB.(4)PDGF-BB组,加入500ng/mlPDGF-BB.应用MTT检测不同处理组对培养细胞增殖的影响,通过流式细胞术Annexin-v测定和DNA分析凋亡细胞,计算各组细胞凋亡率,评价PDGF-BB和IL-1 β对细胞调亡的影响.同时观察细胞不同时期的超微结构形态学变化.结果:IL-1 β组可作为诱导体外培养的腰椎髓核软骨细胞凋亡的模型进行研究.100ng/ml IL-1 β处理后,髓核细胞增殖活力下降,凋亡率显著增高,出现凋亡峰,与对照组相比有显著意义.IL-1 β处理同时,加入500ng/mlPDGF-BB,可以使髓核软骨细胞增殖活力恢复,凋亡率显著下降,凋亡峰消失.与IL-1 β组相比有显著意义.结论:本实验结果显示:应用SD大鼠可以建立合格的腰椎髓核软骨细胞体外培养体系.IL-1 β诱导体外培养的髓核软骨细胞凋亡的机制主要通过分解细胞外基质途径.IL-1 β处理的培养细胞没有失去合成分泌细胞基质的能力.PDGF-B主要通过刺激细胞分裂增殖,恢复细胞合成基质能力来起抗凋亡作用的.PDGF-BB对凋亡细胞的保护作用有望应用于延缓腰椎间盘退行性改变的分子生物治疗.
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