换一批
换一批摘要论文工作构建了新型趋化抗原核酸疫苗的真核表达载体pcDNA3.1-SLC-Her2/p53-Fc,并对其抗肿瘤的生物效应进行了研究.应用计算机分析选择人c-erbB-2(Her-2/neu)和p53基因的部分区域进行拼接,构成融合基因(HP),并在其N端和C端分别引入淋巴细胞的次级淋巴组织样趋化因子SLC和免疫球蛋白IgG<,1>的Fc段基因,可分泌并能主动趋化抗原呈递细胞和通过受体增强对肿瘤抗原特异性的捕捉,提高抗原呈递效果和免疫效果,建立了一种高效独特的趋化抗原核酸疫苗的通用载体系统.将该核酸疫苗导入小鼠黑色素瘤细胞株B16F10细胞,Western Blotting检测分泌表达的趋化因子、肿瘤相关抗原HP和IgG<,1> Fc段的融合蛋白.同时构建表达质粒pcDNA3.1-sig-HP,将其转染入小鼠黑色素瘤细胞株B16F10,建立表达HP融合基因的靶细胞B16F10-HP,进行实验研究.使用基因枪作为转基因工具,对融合的趋化抗原核酸疫苗pcDNA3.1-SLC-HP-Fc在预防和治疗实验小鼠肿瘤的作用和机制进行了研究.分离健康人外周血淋巴细胞,将其中一部分转染pcDNA3.1-SLC-HP-Fc,与剩余部分做混合淋巴细胞培养后,观察对HLA-A*0201阳性及c-erbB-2,p53表达水平不同的肿瘤细胞的杀伤作用,结果表明构建的趋化抗原核酸疫苗所含的抗原表位能被有效地识别,从而诱导免疫应答.
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作者
学术成果认领
发布时间
2005-08-10
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