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摘要食管鳞癌表达下调基因DNA甲基化分析及其相关功能的研究食管鳞癌相关基因Retinoic acid receptor β<,2>(RAR β<,2>)的表达丢失存在于包括食管鳞癌的多种肿瘤中,但该基因的失活机制尚未阐明.本研究采用Methylation-specific PCR(MSP)和亚硫酸氢盐修饰序列分析检测了12个食管鳞癌细胞系中RAR β<,2>基因启动子区域的甲基化状态;同时运用RT-PCR和Western blot分析了该基因的表达情况;进一步用甲基化抑制剂5-aza-2'-deoxycytidine(5-aza-dc)处理RAR β<,2>基因表达丢失或明显下调且携带甲基化位点的细胞系,结果表明在部分细胞系中该基因的甲基化与表达失活密切相关.同时采用MSP和RT-PCR或Western blot检测了51对配对食管鳞癌组织和2个正常食管粘膜上皮RAR β<,2>基因启动子区域的甲基化状态及其表达情况.研究发现食管鳞癌细胞系经过5-aza-dc处理后,伴随着p16基因启动子区域的去甲基化,其表达发生了恢复;p16基因在一定程度上很可能参与了上述细胞系中凋亡的发生过程.此外,在食管鳞癌细胞系中利用MSP和RT-PCR检测了CystatinB基因启动子区域的甲基化状态和其表达情况;进一步用5-aza-dc处理食管鳞癌细胞系发现该基因表达没有恢复;所有这些结果均提示该基因的表达下调可能与其启动子区域的甲基化无关.研究中还发现5-aza-dc处理后的食管鳞癌细胞系中,S100A8和S100A9基因的表达恢复与其启动子区域的甲基化之间很可能存在一种间接的作用关系.本研究不仅有助于进一步了解食管癌变的分子机理,而且更深入地探讨了5-aza-dc抑制肿瘤细胞生长的分子机理,为改善食管癌的预防和治疗提供重要的理论依据.