换一批摘要 本研究以衣原体全基因组为模板，PCR获得衣原体AR39的CP0645和CP0782基因。采用常规的基因重组技术，即限制性内切酶酶切和T4-DNA连接酶连接，将这两个基因克隆到大肠杆菌表达质粒pET28a中。DNA序列分析证实重组质粒含有相应的衣原体基因，其读码框架正确。参照Novagen公司提供的操作手册，表达并纯化了重组的CpRNaseHⅡa和CpRNaseHⅡb。在大肠杆菌BL21(DE3)细胞内，表达的CpRNaseHⅡa中可溶形式占20﹪，而表达的CpRNaseHⅡb可溶形式占65﹪。 进一步以12个碱基对(bp)的RNA/DNA杂合双链做为底物，确定了CpRNaseHⅡa和CpRNaseHⅡb酶促反应的最适pH值、金属离子依赖性和酶切位点特异性。
更多相关知识
作者
学术成果认领
发布时间
2005-11-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
- 浏览58
- 被引1
- 下载0
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
