换一批
换一批摘要本文研究目的在于探讨RNA干扰抑制Stat3表达的作用，及siRNA抑制Stat3表达对前列腺癌细胞增殖、凋亡的影响和在成瘤裸鼠体内的作用。通过设计针对Stat3的特异性siRNA并转染入前列腺癌细胞，观察其对Stat3表达的抑制作用及对细胞生长、增殖及凋亡的影响，进一步构建表达Stat3-shRNA的载体系统，观察对裸鼠移植瘤的治疗作用，并转染前列腺癌细胞形成稳定表达细胞，观察其对细胞的作用及裸鼠的致瘤作用。 本文筛选出的siRNA序列，采用以质粒为基础的人U6RNA聚合酶Ⅲ启动子系统pSilencerTM2.1-U6，构建Stat3特异发夹状siRNA的表达载体，双酶切及测序鉴定重组体，并转染入PC-3细胞，G418筛选稳定表达细胞，荧光定量PCR及Westernblot检测Stat3mRNA和蛋白的表达，MTT检测细胞增殖活性，流式细胞术检测细胞凋亡。揭示了Stat3-shRNA表达载体对裸鼠体内移植瘤具治疗作用，可抑制肿瘤生长，与对照组具显著差异(p＜0.05)。成功构建Stat3-shRNA表达载体，此表达载体可在前列腺癌细胞及裸鼠体内长期而有效地抑制Stat3的表达，逆转前列腺癌细胞恶性表型及致瘤能力，并对成瘤裸鼠具有一定治疗作用，因此以Stat3为靶基因的RNA干扰技术可成为极具潜力的前列腺癌基因治疗方法。
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