抗根癌病多花蔷薇对病原菌侵染的生理及分子响应-论文-万方医学网

抗根癌病多花蔷薇对病原菌侵染的生理及分子响应

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摘要本文针对月季根癌病的抗性资源及抗性机制不明等问题，从月季根部肿瘤中分离病原菌、筛选抗月季根癌病种质资源，并从生理学与分子生物学两个层面着重探讨了多花蔷薇的抗病机理。　　本文.采用抑制差减杂交(suppressionsubtractivehybridization，SSH)方法，构建了根癌土壤杆菌胁迫下多花蔷薇无刺4号增强表达或抑制表达的正反向差减cDNA文库。差示筛选差减cDNA文库的基础上，随机选取增强表达的92个克隆进行测序，去除冗余的cDNA和根癌土壤杆菌的基因片段，共得到53个单一序列(uniqueESTs)。利用GenBank数据库进行核酸和蛋白质同源性比较，多花蔷薇无刺4号受病原菌诱导增强表达的ESTs功能涉及：细胞分裂、生长(22个克隆)；防御、逆境应答、信号转导及激素调节(11个克隆)；初生与次生代谢(10个克隆)。另有10个基因片段功能未知，可能为新的ESTs。RT-PCR进一步分析了9个差减片段受病原菌诱导表达情况。结果显示，其中有8个片段明显受病原菌诱导表达，但诱导表达情况各不相同。　　根癌土壤杆菌胁迫下多花蔷薇无刺4号的基因表达谱分析将为解析其根癌病抗性分子机理、克隆抗性相关基因并为今后开展月季根癌病抗性基因的表达调控及抗病基因工程奠定良好的理论和试验技术基础。