胡杨耐盐相关基因克隆及转化群众杨的研究-论文-万方医学网

胡杨耐盐相关基因克隆及转化群众杨的研究

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摘要胡杨是我国西北干旱盐碱的荒漠和戈壁地带能形成森林的唯一高大乔木树种。由于其具有极强的耐盐能力，近年来对胡杨的研究已成为树木抗盐机理研究的热点。本文对胡杨14-3-3蛋白基因、质膜H+-ATPase基因及Na+/H+逆向转运蛋白基因(PeNHA)进行了基因克隆及转化研究，并取得下述研究进展：建立群众杨组织培养再生体系，并在此基础上利用农杆菌介导的遗传转化方法将35S-PeNHA基因导入群众杨，PCR及PCR-Southern杂交检测结果表明PeNHA已整合到群众杨基因组，获得的再生植株为转基因植株；进行了胡杨14-3-3蛋白基因克隆的初步研究，获得了长为999bp的DNA片段，经测序和同源性分析证明该DNA为14-3-3蛋白基因片段；运用噬菌斑原位杂交法对胡杨的cDNA文库进行了质膜H+-ATPase基因的筛选，并进行了重组质粒λExcell的初步鉴定，得到约1000bp的cDNA片段，推测该片段可能是胡杨质膜H+-ATPase基因；运用DNA重组技术构建了Na+H逆向转运蛋白基因(PeNHA)小球藻表达载体。上述研究进展的取得为进一步阐明胡杨耐盐机理奠定了基础。