检索历史 清除

摘要目的：探索建立创伤性肢体深静脉血栓形成的新型动物模型，并对创伤性肢体深静脉血栓形成与肺栓塞发生的相关性进行研究，建立更符合骨科临床特点的创伤性肢体深静脉血栓研究平台。 方法：1、将120只Wistar大鼠随机分为骨折组、创伤组和对照组，骨折组和创伤组用自制的可定量打击装置击打双大腿近端外侧(不直接损伤血管)，造成不同程度创伤，三组均行髋人字石膏固定，于造模后不同时相点对鼠隐大静脉血栓形成情况进行大体观察和病理学检测，确定造模成功后，再比较各组深静脉血栓的发生率，对静脉血栓及动脉血栓形成情况、血管内膜和静脉内皮细胞的变化进行观测。 2、将120只新西兰大白兔随机分为骨折组、创伤组、固定组和空白对照组，运用上述装置击打新西兰大白兔左大腿近端外侧(不直接损伤血管)，固定方式改为左侧屈髋屈膝位固定。在不同时相点分别对四组实验动物的深静脉血栓形成及肺栓塞情况进行大体、光镜、电镜观察，全自动血球计数仪和全自动血凝仪检测RBC、WBC、PLT、HB、MID、PT、INR、Fib、TT、APTT、D-Dimer，免疫组化检测MMP-2、CD34、FVⅢ-RAg，高频彩色多普勒血流显像、DSA、MRA、MRDTI进行超声、影像学观测。 结果：在Wistar大鼠和新西兰大白兔上均造模成功。在Wistar大鼠模型中：骨折组第7天隐大静脉血栓发生率为85％，高于创伤组和对照组，差别有统计学意义(P＜0.05)，未发现隐动脉血栓形成。在新西兰大白兔模型中：骨折组、创伤组第7天股静脉血栓发生率分别为75％和80％，高于无创伤固定组和空白对照组，差别有统计学意义(P＜0.05)；骨折组和创伤组组间差别无统计学意义(P＞0.05)，可见少数股动脉血栓形成；深静脉血栓发生率与肺栓塞发生呈正相关(Spearman相关系数为0.878，P＜0.05)；骨折组、创伤组与固定组、对照组在PT、INR、Fib、TT、APTT、D-Dimer上差别有统计学意义(P＜0.05)；兔左下肢屈髋屈膝位较伸直位时股静脉血流速度减慢、血管内径变小(P＜0.01)；DSA和MRA的血栓检出结果相符，MRDTI对血栓有一定检出率；免疫组化检测MMP-2、CD34、FVⅢ-RAg结果阴性。 结论：1、本研究用创伤、固定制动的方式模拟出骨科临床创伤性肢体深静脉血栓形成的病理变化过程，首次成功建立了创伤性肢体深静脉血栓形成的动物模型。2、该实验显示创伤性肢体深静脉血栓形成与静脉内皮细胞损伤，血流速度减慢和血液的高凝状态有关。3、对其与肺栓塞的相关性进行了初步研究，显示创伤性肢体深静脉血栓发生率与肺栓塞的发生呈正相关。4、用血管造影、磁共振在创伤性肢体深静脉血栓形成诊断方面进行对比，显示磁共振血管成像(MRA)是检测创伤性肢体深静脉血栓的有效方法，磁共振血栓直接成像(MRDTI)代表了无创检查的方向。5、全自动血球计数仪和全自动血凝仪使血球计数、凝血、纤溶指标检测更简便、准确、可靠。6、用免疫组化从分子水平了解创伤性炎症反应与血栓形成的关系，CD34、MMP-2和FVⅢ-RAg分子表达均为阴性，究其原因，可能为：1)在应用自制打击装置定量击打、固定制动的方法对新西兰大白兔造成的创伤性肢体深静脉血栓动物模型中，CD34、MMP-2和FVⅢ-RAg分子的表达与血栓形成无关；2)抗原的种属间差异所致，值得进一步采用抗兔相关抗体进行确认。该造模方法简便易行，深静脉血栓发生率高、可重复性好、结果稳定。作为一种可靠模型，将为今后进一步深入研究创伤性肢体深静脉血栓形成的发生、发展变化规律及其影响因素，深静脉血栓和肺栓塞等严重并发症的防治奠定基础，具有重要的现实意义。