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谷氨酰胺、锡类散对大鼠贮袋炎治疗作用的研究

摘要目的:探讨谷氨酰胺、锡类散灌肠对大鼠实验性贮袋炎的治疗效果及其与抗氧自由基有关的机制。 方法:采用SD大鼠36只,行全结肠切除回肠贮袋直肠吻合术作成贮袋模型。将36只贮袋模型大鼠随机分为贮袋组(Pou组)9只和贮袋炎组(Pouchitis组)27只;贮袋炎组用Shebani法建立贮袋炎模型。贮袋炎组又分为贮袋炎对照组(Con组)9只,治疗组18只,即:谷氨酰胺治疗组(Gln组)9只,锡类散治疗组(Xil组)9只。术后30天贮袋炎组给予5%葡聚糖硫酸钠(Dss)自由饮用4天建立贮袋炎模型,Pou组给予生理盐水自由饮用4天。术后34天,即贮袋炎模型建立后,Pou组和Con组给予生理盐水每天一次连续灌肠7天,Gln组给予3%谷氨酰胺每天一次灌肠连续治疗7天,Xil组给0.06g/kg锡类散每天一次灌肠连续治疗7天,每次灌肠液为6ml/kg。从术后34天开始记录大鼠体重,腹泻和大便隐性或显性出血情况。所有动物分别于术后41天给予处死,取贮袋相同位点组织,做普通病理切片,采用病理组织学评分判断病变损伤程度。同时对回肠贮袋进行组织匀浆,测量黄嘌呤氧化酶(XOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的活力。 结果:(1)治疗前,Con组、Gln组、Xil组,腹泻,体重,大便显性或隐性出血情况均较Pou组严重(P<0.01);Gln组、Xil组、Con组相比,统计学差异无显著性(P>0.05)。治疗后,Con组腹泻情况较Pou组严重(P<0.01),而Gln组、Xil组与Pou组相比,统计学差异无显著性(P>0.05),Gln组、Xil组可见部分大鼠腹泻停止,Gln组、Xil组腹泻情况轻于Con组(P<0.05),Gln组与Xil组差异无显著性(P>0.05)。治疗后,Gln组、Xil组、Con组较Pou组大便隐性或显性出血程度严重(P<0.01),Gln组较Con组轻(P<0.01),Xil组较Con组轻(P<0.05),Gln组与Xil组差异无显著性(P>0.05)。治疗后,Pou组、Con组、Gln组、Xil组体重分别为:313.33±8.40g,277.11±10.52g,299.00±9.97g,295.89±9.91g,Con组、Gln组、Xil组体重均较Pou组低(P<0.01),Gln组、Xil组均较Con组高(P<0.01),Gln组与Xil组相比,差异无显著性(P>0.05)。(2)光镜下观察及病理学评分:Pou组未见贮袋炎病理损伤改变,Con组可见明显贮袋炎病理损伤改变,Gln组、Xil组见轻微贮袋炎病理损伤改变。病理组织学评分提示:Pou组分数均低于Con组、Gln组、Xil组(P<0.01);Gln组、Xil组分数均低于Con组(P<0.01);Gln组、Xil组相比,差异无显著性(P>0.05)。(3)GSH-PX和XOD活力测定:Pou组、Con组、Gln组、Xil组GSH-PX活力分别为:99.13±4.23U/gprot,58.77±2.27U/gprot,78.62±2.97U/gprot,81.15±2.54U/gprot。Con组、Gln组、Xil组GSH-PX活力均低于Pou组(P<0.01),Xil组、Gln组GSH-PX活力均明显高于Con组(P<0.01),Gln组与Xil组相比,差异无显著性(P>0.05)。Pou组、Con组、Gln组、Xil组XOD活力分别为:6.18±0.39U/gprot,13.96±0.94U/gprot,10.63±0.60U/gprot,11.10±0.56U/gprot。Con组、Gln组、Xil组XOD活力均高于Pou组(P<0.01)。Gln组、Xil组XOD活力均明显低于Con组(P<0.01),Gln组与Xil组相比,差异无显著性(P>0.05)。贮袋病理组织损伤程度与XOD活力呈明显正相关关系(r=0.960,P<0.01);贮袋病理组织损伤程度与GSH-PX活力呈明显负相关关系(r=-0.931,P<0.01)。 结论:参照Shebani法建立的贮袋炎模型是成功的。氧自由基的增加,清除氧自由基能力的下降在贮袋炎的发生中起了重要作用。谷氨酰胺(Gln)、锡类散(Xil)分别可以减轻大鼠实验性贮袋炎临床症状,改善贮袋组织病变情况,显著提高贮袋组织谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活力,明显降低贮袋组织黄嘌呤氧化酶(XOD)活力,对贮袋组织有保护作用。谷氨酰胺(Gln)和锡类散(Xil)治疗贮袋炎的效果相似。本实验为临床应用谷氨酰胺(Gln)或锡类散(Xil)治疗贮袋炎提供了一些实验依据。

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