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摘要β-catenin/TCF通路不仅在胚胎发育过程中具有至关重要的作用，而且还与众多不同组织来源的干细胞的自我更新及分化密切相关。已有的研究结果表明，β-catenin/TCF通路的异常激活参与许多人类肿瘤的发生发展。在食管鳞状细胞癌(鳞癌)或浆液型卵巢癌等肿瘤中，诸多证据显示，虽然β-catenin/TCF通路的异常活化普遍存在，但在这些肿瘤中，APC、CTNNB1、Axin等β-catenin/TCF通路中的重要基因突变检测率往往很低；因此，β-catenin/TCF通路重要成员的表达异常(mRNA或蛋白水平)，而非基因DNA水平的突变很可能是导致该通路在这些肿瘤中异常活化的原因。本室前期的实验结果和文献报道提示，FRAT1和EB1在一些肿瘤(如食管癌等)中高表达；而FRAT1可以激活β-catenin/TCF通路，EB1也可能通过影响APC的功能来激活β-catenin/TCF通路；那么，在这些肿瘤中β-catenin/TCF通路异常活化是否由于FRAT1或EB1高表达所致?迄今尚无答案。 为了解答这些问题，首先克隆了FRAT1和EB1的真核表达质粒和RNAi质粒并将其分别转染细胞，观察它们对细胞生长等表型的影响以及对β-catenin/TCF通路活性的影响等；进而通过原位杂交和免疫组化的检测方法，探讨在肿瘤标本中二者与β-catenin表达的相关性。经过综合分析，结果如下： 第一，74％的食管癌组织中FRAT1的mRNA表达水平明显高于对照正常组织，而且FRAT1能显著促进食管癌细胞KYSE150的生长，利用RNAi下调FRAT1的表达则减缓其生长。FRAT1还能增强HEK293细胞的软琼脂集落形成能力，并使NIH3T3细胞在裸鼠中形成肿瘤。而且，发现利用RNAi下调c-Myc的表达可以逆转FRAT1的癌基因效应。另外，FRAT1能够促进β-catenin细胞核累积和β-catenin/TCF的转录活性，这些效应可以被GSK-3β或△NTCF4所拮抗。而在食管鳞癌标本中，FRAT1的高表达与β-catenin的浆与核累积现象密切相关。 第二，分别使用原位杂交和免疫组化检测卵巢癌组织芯片上FRAT1和β-catenin的表达状况，发现46％的浆液型卵巢癌表达FRAT1，而59％的浆液型卵巢癌存在β-catenin的细胞核和/或细胞浆累积，而且FRAT1的高表达与β-catenin的浆与核累积现象密切相关。 第三，发现63％的食管癌组织中EB1表达水平明显高于对照正常组织，而且EB1能显著促进食管癌细胞EC9706的生长，利用RNAi下调EB1的表达则减缓其生长。另外，EB1能够促进β-catenin细胞核累积和β-catenin/TCF的转录活性，这些效应可以被APC或△NTCF4所拮抗，而且通过免疫共沉淀实验证明，EB1的确可以影响APC和β-catenin之间的结合。在食管鳞癌标本中也发现，EB1的高表达与β-catenin的浆与核累积现象密切相关。 综上所述，实验结果表明：癌基因FRAT1高表达是食管鳞癌或浆液型卵巢癌中β-catenin/TCF通路异常活化的重要原因之一，而且，c-Myc在FRAT1作为癌基因参与调节细胞的生长和转化这一过程中具有十分重要的作用。EB1具有癌基因的某些特性，很可能通过竞争性地与APC结合，进而影响APC和β-catenin之间的相互作用，使得β-catenin有效降解过程受阻，造成β-catenin在细胞浆与核的累积，从而可以激活β-catenin/TCF通路，促进细胞生长，参与食管癌的发生发展。因此，FRAT1或EB1可能成为食管鳞癌、浆液型卵巢癌等肿瘤潜在的治疗靶点。