摘要复方四君子汤化学研究中药复方是中医治病的主要临床应用形式,复方中的化学成分是中药发挥药效作用的物质基础。对复方化学成分进行研究,在阐明中医的方药理论,揭示中药的配伍规律和作用机制,优化制剂工艺,制定质控标准,实现中医药现代化并走向国际市场等方面具有重要意义。健脾益气经典名方——四君子汤由人参、白术、茯苓、炙甘草组成,具有益气补中、健脾养胃之功效;在心脏、肠胃运动功能、免疫系统调节以及辅助化疗放疗治疗癌症中有广泛应用,疗效确切。本文应用现代分析手段首次对其中的化学成分进行系统分析研究。 本文首次应用传统液相色谱对复方四君子汤及组成复方单味药的化学成分进行比较分析,发现复方乙酸乙酯和正丁醇萃取物中的主要成分来源于君药人参和使药甘草。第一次对复方中多种结构类型的有效成分人参皂苷(Rg1,Re,Rb1),甘草黄酮(甘草苷、异甘草苷、甘草素、异甘草素)和甘草酸进行含量测定;为中药复方的质量控制提供实验依据。 为进一步阐明复方中的化学成分并探索中药配伍的内在物质基础,本文首次应用液相串联质谱、质谱-质谱串联技术对复方四君子汤进行研究。液质分析与传统液相分析所得结论相符——四君子汤的水溶性成分主要来源于君药人参和使药甘草。在四君子汤水煎剂中共发现28个主要色谱峰,其中12个来源于人参、16个来源于甘草,为三种类型的化合物——人参皂苷、甘草黄酮和三萜酸。通过分析此三类不同结构标准品的质谱图,建立并总结了三类不同化合物的分析方法和质谱裂解规律。运用此裂解规律、参考文献对复方中检测到的同类物质(没有标准品)进行结构分析,推测8个人参皂苷、3个黄酮及2个三萜酸的可能结构。填补了复方四君子汤化学成分研究的空白,为其今后的深入研究奠定基础。 虽然现阶段研究未发现药物配伍产生新的化学成分,而且结果显示臣药白术、佐药茯苓对复方的化学成分贡献微薄,但用半定量的分析方法却发现复方配伍前后这些来源于人参和甘草的主要成分的含量比例发生了明显变化;提示了药物的配伍可以改变某些活性成分在同类成分中所占有的比例。因而不能从表观现象主观地忽略白术与茯苓在复方中所占据的地位。化学成分含量的微妙改变恰恰揭示了中药的配伍规律和作用机制。 中药复方成分最终要被体内吸收进入血液,血液中成分与其药理作用密切相关。因此研究复方血液中的成分也是认识复方药效物质基础的重要方法。为研究四君子汤进入体内的代谢物,将复方提取物(1g/ml)连续五天给大鼠灌胃,取大鼠血浆进行分析。结果发现复方进入体内代谢为极性小于复方原有成分的物质,提示进入血液循环的可能是某些小分子代谢产物。由于复方成分的复杂,血浆内源物的强干扰;我们从最简单的体外实验开始,最初对复方君药活性成分人参皂苷Rg1,Re,和Rb1进行体外人工胃液实验,探讨复方中的主要活性成分人参皂苷进入体内最初的代谢产物,为今后进一步研究复方这个复杂体系的体内有效活性成分提供实验依据。实验结果显示皂苷类成分经胃液消化后,主要代谢物为原药水解产物以及水解产物的水合物,并发生立体构型的改变。这与复方体内实验所示血浆内代谢物的极性小于原药相符。 本文旨在探讨应用现代分析手段对传统中药复方四君子汤的研究方法,此阶段性工作为复方四君子汤的临床应用提供了化学物质基础。 中药红芪化学成分的研究多序岩黄芪为豆科岩黄芪属植物,《中国药典》(2000年版)收载的常用中药红芪为多序岩黄芪的根,具有和黄芪相同功效。 本课题对多序岩黄芪的根茎乙醇冷浸提取物进行了初步研究从中分离得到8个化合物,利用各种光谱技术鉴定为4'-甲氧基-7-羟基-黄酮,3-羟基-9-甲氧基紫檀烷,荭草苷,阿魏酸十六烷醇酯,二十六碳酸,羽扇豆醇,β-谷甾醇,和胡萝卜苷。其中化合物4'-甲氧基-7-羟基-黄酮,二十六碳酸,阿魏酸十六烷醇酯,羽扇豆醇,和荭草苷首次从多序岩黄芪中分离得到。
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