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摘要油菜(BrassicanapusL.)是一种适应性强、用途广、经济价值高的油料作物。在我国，油菜是食用油的重要来源，而细胞核雄性不育在油菜杂交种子生产中具有重要的意义。近年来，国内外油菜正发生两大变革：一是杂交种替代自交系品种。油菜具有显著的杂种优势，优良的油菜杂交组合，一般可增产20％-30％；其次是双低油菜(低芥酸、低硫代葡萄糖苷)替代原有的普通油菜(高芥酸、高硫代葡萄糖苷)。双低油菜的菜油中对人体无益的芥酸含量低于5％，而高营养价值的亚油酸和油酸含量分别高达25％和60％左右；饼粕中硫代葡萄糖苷(简称硫苷)含量低于30umol·L-，可直接作为蛋白饲料喂养畜禽。 随着分子生物学的飞速发展，分子标记技术也随之迅速发展起来，并且在许多研究领域中得到了应用。分子标记是建立在DNA基础之上的一种较为理想的遗传标记方法，它突破了表达型标记的局限性，其变异只来源于基因DNA序列的差异，具有稳定性高、受环境条件影响小、信息含量高、可比性好等优点，在提高选择效率，培育好的油菜品种方面发挥着重要的作用。 目前分子标记的检测技术多种多样，新的方法不断产生，已有几十种技术可用于分子标记的筛选。本研究针对甘蓝型油菜雄性不育恢复基因，以沪油4004和4136双低油菜为材料，利用随机扩增多态性DNA(RandomAmplificationPolyraorphicDNA，RAPD)和扩增片段长度多态性(Amplifiedfragmentlengthpolymorphisms，AFLP)两种分子标记技术研究与恢复基因连锁的分子标记，开展相应的分子标记辅助育种，提高恢复基因的选择效率，缩短恢复系培育周期，同时还能用于杂交种的纯度鉴定，代替周期长、容易受环境条件限制的异地、异季鉴定、减少人力财力的投入。本研究的主要实验结果和结论如下： 1.选用的192对AFLP引物组合中，在两群体间存在差异片段的引物共7对：引物组合分别为：M4/H5、M4/H6、M2/Hl、M3/H5、E5/M2、E3/M1、E2/M1，扩增出的相应的特征差异片段分子量约为470bp，510bp，110bp，150bp，50bp，200bp，810bp. 2.通过连锁分析，在7对有多态片段的引物对中，扩增出的多态片段与目标基因紧密连锁的有5对：M4/H5，M2/H1，E5/M2，E3/M1，E2/M1。 3.AFLP技术操作复杂，为了适用于大田实验，有必要将AFLP标记转化成易于简便易于操作的SCAR标记，实验中5个AFLP标记有2个成功转化成了SCAR标记，这两个标记是M4/H5和E5/M2引物组合扩增出的差异片段。 4.在选用的60对RAPD随机引物中，筛选到在两群体间出现差异片段的引物有3个，经重复，差异片段没有重现，故在两群体间没有找到存在稳定差异的RAPD引物。