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<'41>Ca-AMS示踪破骨细胞骨吸收的方法研究

摘要骨质疏松作为一种世界范围内的高发病,严重威胁着人们尤其是中老年人的健康,已经日益引起人们重视。有关骨与矿物质代谢规律的细胞分子机理研究是骨质疏松的重要内容。破骨细胞首先吸收旧骨,然后成骨细胞再形成新骨,两者相辅相成共同构成了一个骨形成的平衡。破骨细胞骨吸收作用规律与其他因素对破骨细胞骨吸收作用的影响是两项非常重要的研究课题。 本项工作通过考察GaCl3对破骨细胞破骨行为的影响,探索41Ca示踪法在体外破骨作用研究中的应用。将破骨细胞与人工合成含41Ca的羟基磷灰石、GaCl3共抚育,在1天、2天和7天时分别分离和收集培养液和破骨细胞样品。AMS测定结果表明在细胞实验期间,第1d时细胞内的41Ca/Ca处于较高水平,随后2d与7d时细胞内的41Ca/Ca比较接近。而培养液中的41Ca/Ca在第1d时比第2、7d时的低,第2、7d时的41Ca/Ca也比较接近。 这说明了在细胞与骨颗粒共孵育的第1,破骨细胞主要从骨颗粒中摄取钙离子,而与培养液之间的钙离子交换作用较弱;随后,破骨细胞从骨颗粒中摄取钙离子的能力减弱,而与培养液之间的钙离子交换作用相对增强。比较GaCl3对培养液和细胞中41Ca/Ca的影响,可见培养液中有20μMGaCl3存在时,第1、2d时细胞中41Ca/Ca相对无GaCl3存在时较少;第2、7d时培养液中41Ca/Ca也相对较少。有20μMGaCl3存在时,被消融的骨钙量偏小的趋势反映了GaCl3对破骨作用的抑制能力。 尽管细胞中的总钙量远小于培养液中的总钙量,但在示踪实验期间,破骨细胞摄入的41Ca量比散布到培养液中的多,尤其是在实验开始的第1、2d时。这说明在破骨作用过程中,破骨细胞本身有较强的钙代谢能力,其摄入骨钙的速度明显超过了消融出的钙离子与细胞外液中的交换速度。

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