摘要第一部分 国产超顺磁氧化铁纳米颗粒标记兔骨髓间充质干细胞的体外研究 目的: 探讨国产超顺磁氧化铁纳米颗粒(superparamagneticironoxidenanoparticles.SPION)标记兔骨髓间充质干细胞(bonemarrowmesenchymalstemcells.BMSC)的可行性、理想标记浓度和时间、对细胞活力的影响。 材料与方法: 原代培养兔BMSC至第五代,检测CD44,CD34和CD45。SPION分别以每毫升O.03mg、0.015mg、0.007mg和0.0035mg的浓度标记BMSC24h,普鲁士兰铁染色,计算标记率,选出理想浓度。以理想浓度分别标记BMSC24h、48h、72h和96h,计算标记率,得出理想标记时间。台盼蓝染色测定经理想浓度和时间标记的BMSC活力。 结果: 第5代BMSCCD34和CD45阴性,CD44阳性。标记24h,O.007mg/ml组(80.6%±1.7%)明显高于0.0035mg/ml组(55.8%±1.4%),P<O.01;0.015mg/ml组(904%±1.2%)明显高于0.007mg/ml组,P<O.01;0.03mg/ml组(92.3%±1.1%)与0.015mg/ml组无明显区别,P>O.05。以0.015mg/ml标记,48h组(91.3%±0.8%)明显高于24h组(89.4%±O.8%)P<0.05;72h组(98.7%±O.9%)明显高于48h组,P<O.01;96h组(98.4%±0.1%)与72h无明显差异,P>0.05。0.015mg标记72h后台盼蓝染色细胞存活率>95%。 结论: 国产SPION可以用于标记兔BMSC,0.015mg/ml标记72h是理想的标记浓度和时间,不降低细胞的活力。
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