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皮层扩散性抑制诱导大鼠脑缺血耐受的实验研究

摘要第一部分在体研究皮层扩散性抑制动物模型的建立 目的:用KCI和针刺分别在鼠皮层诱导皮层扩散性抑制(CorticalSpreadingDepression,CSD),建立大鼠CSD动物模型,并评价其光学特性和电生理特性,为进一步的研究奠定基础。 方法:采用Spangue-Dawley大鼠25只,随机分为针刺诱导组(n=10)、KCI诱导组(n=10)和NaC1对照组(n=5),用牙科钻在大鼠颅骨上分别钻磨出诱导窗口和观测窗口,分别在诱导窗口用针刺和滴加KCI棉片浸敷大鼠皮层的方法诱导大鼠脑CSD,对照组在诱导窗口滴加NaCl,并用电生理记录和光学成像的方法来描记CSD的产生与传播,分析其特点。 结论:用本方法制作CSD动物模型,方法简单易行,可以用光学成像的方法直观观测CSD的产生、发展和传播,并结合电生理观测到一直结果,适于在体研究CSD,为进一步研究CSD的发生机制及其可能的作用提供了一种有效手段。 第二部分皮层扩散性抑制预处理对大鼠脑缺血性损伤的保护作用的在体研究 目的:研究KCl诱导皮层扩散性抑制(CSD)预处理对鼠大脑中动脉阻塞后脑血流灌注和梗死体积的影响,验证CSD对脑缺血性损伤的保护作用。 方法:24只SD大鼠分为实验组和对照组,各12只,试验组用5mKCl棉片敷于大鼠颅骨小孔上,每20min更换一次,持续2h,在大鼠大脑皮层诱发CSD,3d后插线法栓塞大脑中动脉制备大鼠局灶性脑缺血模型,利用激光散斑衬比光学成像技术监测缺血2h大脑血流动力学变化,并测定大脑梗死病灶体积。对照组用NaCl代替KCl,其余相同。比较血流动力学变化和大脑梗死灶体积的大小。 结论:利用激光散斑衬比光学成像技术可以在体检测脑血流的变化,同时验证了CSD预处理可提高缺血病灶皮层的血液灌注水平,减少总梗死体积和皮层梗死体积,可以减轻脑缺血后的脑功能损害程度。 第三部分皮层扩散性抑制预处理对大鼠脑缺血性损伤后神经再生的影响 目的:研究皮层扩散性抑制(corticalspreadingdepression,CSD)对成年大鼠脑缺血后缺血侧神经再生的影响。探讨CSD对缺血性脑损伤保护作用的机制。 方法:用KCl诱导鼠皮层扩散性抑制,采用线栓法制作大脑中动脉阻塞(MCAO)模型。72只S-D大鼠动物分为6组:1)正常鼠诱导CSD组;2)KCl诱导CSD预处理缺血组;3)N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体拮抗剂MK-801阻断CSD缺血组;4)NaCl预处理缺血组;5)非预处理缺血组;6)空白对照组:即非CSD、非缺血假手术组。采用免疫组化法观察脑缺血后1,3,7,与14d四个不同时相BrdU免疫阳性细胞的表达情况。 结论:CSD可诱导正常大鼠脑和脑缺血相关脑区BrdU免疫阳性细胞表达,且CSD可进一步激发脑缺血后神经再生的潜能,提示CSD激发鼠脑神经再生可能是其诱导脑缺血保护的主要机制之一。

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