山羊子宫内膜腺上皮细胞的分离培养及其对猪PBMC的影响-论文-万方医学网

山羊子宫内膜腺上皮细胞的分离培养及其对猪PBMC的影响

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摘要本试验建立一个子宫内膜腺上皮细胞的分离培养体系，探讨了性成熟山羊和羔羊子宫内膜腺上皮细胞的分离纯化方法，并进行其与PBMC的共培养，通过MTT法检测培养的细胞对PBMC活性的影响。为阐明动物不同生殖生理时期内分泌和免疫系统的相互影响提供试验依据，获得了以下结果： 1.进行山羊子宫内膜消化试验以及腺上皮细胞分离纯化试验，证明了当用2g/L的胶原酶于37℃消化4h时，可以获得大量的细胞，利于细胞的分离。将消化的组织液液过200目滤网后，利用低速离心和反复沉降的方法，得到内膜腺上皮细胞经免疫组织化学鉴定，其纯度达95％以上。 2.比较性成熟山羊和羔羊的子宫内膜腺上皮的生长特性，证明：不同时期的腺细胞其生长情况有所差异，羔羊的生长速度较快。 3.建立了一种新的共培养方法，并将其与猪PBMC进行共培养。显示，这种方法可满足腺上皮细胞与PBMC相互作用研究的需要；与其他几种共培养方法比较，操作简单。 4.证明子宫内膜腺上皮细胞和猪PBMC共培养以及条件培养液均能显著刺激PBMC的增殖；腺上皮细胞能够抑制PHA-P对PBMC的增殖作用。提示子宫内膜腺上皮细胞可影响PBMC的活性，参与了子宫免疫平衡的调节。本试验对子宫内膜腺上皮细胞的分离培养条件的探讨，所得的腺上皮细胞纯度达95％以上；同时，将其与猪PBMC共培养，发现子宫内膜腺上皮可直接影响PBMC。