摘要本实验选用卵巢癌细胞株进行体外实验,观察超声造影剂介导基因治疗的可行性,研究超声照射时间和超声造影剂剂量对人野生型PTEN质粒导入人卵巢癌细胞效果的影响,目的是探讨一种新型、高效的基因导入方法及PTEN基囚影响卵巢癌的实验研究。实验分为三部分:论文一探讨了超声造影剂促进细胞转染的体外实验模式的建立。论文二研究了超声造影剂介导PTEN基因转染人卵巢癌细胞及其相关特性。论文三探讨了超声造影剂介导PTEN基因转染对人卵巢癌细胞体外粘附、迁移和侵袭影响的研究。并对相应的作用机制进行了初步探讨,试图为进一步的超声治疗卵巢癌体内试验研究提供依据,并为卵巢癌治疗提供新的思路。 目的:探讨超声介导造影剂微泡破裂法促进外源性基因定向转移的实验模式,以期为肿瘤的基因治疗研究提供新思路。 结果在目的基因转染过程中,转染方法对靶细胞的安全性是实验首先考虑的因素。通过不同实验组以MTT法检测不同超声照射时间对细胞的杀伤作用,结果显示:在超声作用强度0.7W/cm<'2>,作用时间小于60s,对靶细胞安全性较高,随超声照射时间延长,细胞存活率明显下降。国外有关研究显示,当超声功率大于0.6W/cm<'2>时,目的基因在靶细胞才能有效表达。所以,本实验设定超声参数为:超声波强度0.7W/cm<'2>,作用时间30s。当超声强度为0.7W/cm<'2>,MI为1.0,作用时间30秒时,检测体外培养细胞实验组存活率是70.01%,通过组间对照细胞活性无明显影响,随着超声照射时间的延长,细胞存活率明显下降;造影剂浓度是10%时,对细胞活性无明显影响,并且达到了最高的基因转染率。 结论: 超声介导造影剂微泡破裂法促进目的基因的定向转移是一种安全、高效的靶向性基因转移方法,为卵巢癌的基因治疗提供了部分实验基础。
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