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摘要艾滋病(AIDS)是由人类免疫缺陷病毒(HIV)感染引起的一种后天性人类免疫缺陷综合症。HIV属于囊膜病毒，其囊膜蛋白复合物控制着病毒进入靶细胞的关键步骤，即决定着病毒趋向性和促进病毒基因组进入靶细胞以及感染细胞与邻近的非感染的细胞之间的膜融合过程。 介导病毒膜与靶细胞膜融合的关键分子是HIV-1囊膜糖蛋白gp41，其结构相对保守，针对gp41的药物可能避免耐药性的形成，是抑制病毒进入靶细胞的理想靶位。gp41的晶体结构已经明确，其融合活性构象的核心结构是一个由三个发卡结构紧密排列而成的六聚体螺旋束，gp41核心结构域的N端螺旋形成中心的三聚体，而C端螺旋以反平行方式堆积在N端螺旋形成疏水槽表面，组成外层的三聚体螺旋。该空间构象已被证实是促使病毒与靶细胞膜融合如的关键构象，结构十分稳定，从而为AIDS疫苗和抗AIDS药物的研究提供重要的信息。本课题中展示的HIV-1gp41N端为aa534-678，在基因组的位置是7304bp至8338bp，包含了gp41模拟核心结构域N51(L6)C43。 本研究的主要内容包括表面展示载体的改造，HIV-1gp41表面展示载体的构建以及在酿酒酵母中的表面展示研究。 首先，构建标签载体。在载体pICAS的多克隆位点后，加入FLAG及6×HIS标签。经过鉴定测序，得到了标签载体pICAS-FLAG，pICAS-6HIS。其次，构建gp41表面展示载体。以pMDl8V-gp41为模板，将扩增得到的gp41目的片段，定向克隆至pICAS-FLAG和pICAS-6HIS载体，得到重组展示载体pICAS-6HIS-gp41和pICAS-FLAG-gp41。然后，将重组表达载体线性化后，转化到酿酒酵母MT8-1中，在色氨酸营养缺陷型平板SD上筛选阳性重组转化子，通过菌落PCR鉴定，最终筛选得到含有重组质粒的酵母转化子。最后利用葡萄糖诱导培养重组转化子，收集细胞，进行免疫荧光试验。经荧光显微镜和流式细胞仪检测分析鉴定，对gp41的表面展示进行定量与定性分析，结果表明：功能的HIVo-1gp41成功地展示在酵母细胞表层；在本课题研究的表面展示系统中，FLAG作为标签比6×HIS灵敏，并且以FLAG作为标签更有利于HIV-1gp41的表达。为HIV体内外抗体检测和筛选奠定基础。