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摘要目的:通过高糖高胰岛素培养诱导3T3-L1脂肪细胞株构建胰岛素抵抗(insulin resistance，IR)模型，观察IR脂肪细胞miR-21表达量的变化及脂肪细胞miR-21表达增加对IR的改善作用，并初步探讨其改善脂肪细胞胰岛素敏感性的部分机制。<br>　　方法:<br>　　(1)通过传统的鸡尾酒方法诱导3T3-L1前脂肪细胞分化成熟脂肪细胞;<br>　　(2)将成熟3T3-L1脂肪细胞分为正常糖低INS(NGLI)组、正常糖高INS(NGHI)组、高糖低INS(HGLI)组、高糖高INS(HGHI)组，应用氚标记的2-脱氧葡萄糖(2-3H-DG，2-DG)摄取试验检测脂肪细胞INS敏感性，通过高糖高胰岛素处理建立3T3-L1成熟脂肪细胞IR模型;<br>　　(3)将IR脂肪细胞分为3组:IR组、转染含pmiR-21质粒转染组(pmiR-21)、转染空质粒转染组(pNC)，并设立对照组（正常脂肪细胞），实时荧光定量RT-PCR技术检测各组脂肪细胞miR-21表达水平差异;<br>　　(4)应用2-DG摄取试验检测以上各组脂肪细胞的INS敏感性;<br>　　(5)Western blot技术检测各组脂肪细胞PTEN蛋白、Akt蛋白以及p-Aktser473蛋白水平的差异。<br>　　结果:<br>　　(1)3T3-L1前脂肪细胞分化成熟，诱导第10天油红O染色可见呈圆形或椭圆形，细胞浆内大量红色脂滴聚集的分化成熟的3T3-L1脂肪细胞;<br>　　(2) NGHI组与NGLI组相比3T3-L1细胞INS刺激葡萄糖摄取无显著差异(P＞0.05)。HGLI组的3T3-L1细胞INS刺激葡萄糖摄取与NGLI组相比减少(P＜0.05)。HGHI组与NGHI组相较葡萄糖摄取减少(P＜0.05)。HGHI组与NGLI组3T3-L1脂肪细胞葡萄糖摄取率相比明显减少(P＜0.01);<br>　　(3) IR组miR-21表达较对照组下降(P＜0.05)，pmiR-21组miR-21的表达与对照组相比，表达量无显著差异（P＞0.05），pmiR-21组与IR组比较，miR-21表达量增加(P＜0.05)。pNC组与对照组相比表达下降(P＜0.05)，与IR组比较表达量无显著差异（P＞0.05）;<br>　　(4) IR组与对照组比较，INS刺激葡萄糖摄取率减少(P＜0.05)。pmiR-21组与对照组相比，INS刺激葡萄糖摄取率无显著差异(P＞0.05)，与IR组比较摄取增加（P＜0.05）。pNC组脂肪细胞与对照组比较INS刺激葡萄糖摄取率减少(P＜0.05)，与IR组相比无显著差异（P＞0.05），与pmiR-21组相比较减少（P＜0.05）;<br>　　(5) IR组3T3-L1脂肪细胞与对照组相比PTEN蛋白的表达量增加(P＜0.05)，p-Aktser473表达减少（P＜0.05）。pmiR-21组与对照组相比，PTEN及p-Aktser473表达均无显著差异（P＞0.05），与IR组比较PTEN表达减少（P＜0.05），p-Aktser473表达增加（P＜0.05）。pNC组与对照组相比PTEN表达增加(P＜0.05)，p-AktSer473表达减少(P＜0.05)，与IR组比较PTEN及p-Aktser473表达无显著差异(P＞0.05)。各组脂肪细胞的Akt表达无显著差异（P＞0.05）。<br>　　结论:<br>　　(1)高糖高INS诱导3T3-L1脂肪细胞产生IR，miR-21表达减少，PTEN蛋白表达增加，p-Aktser473表达减少，Akt表达无明显改变;<br>　　(2)转染pmiR-21使miR-21在IR的3T3-L1脂肪细胞表达增加，PTEN蛋白表达减少，AktSer473磷酸化增加，Akt表达无明显改变，细胞INS敏感性增加;<br>　　(3) miR-21可能通过负向调节PTEN蛋白的表达，使mktSer473的磷酸化增加，从而起到改善IR的作用。<br>