一种促进贻贝分泌足丝的外源注射神经递质及其筛选方法和应用
摘要本发明属于生物技术领域技术领域,具体公开了一种促进贻贝分泌足丝的外源注射神经递质及其筛选方法和应用。本发明对厚壳贻贝足丝分泌不同阶段时的足组织进行了神经递质靶向分析,发现了神经递质五羟色胺(5‑HT)和肾上腺素(EPI)在足探索阶段相对含量显著升高(P<0.05),表明5‑HT和EPI可能参与调控足丝分泌。通过外源注射5‑HT和EPI至贻贝闭壳肌,发现经注射10‑3MEPI 72h后贻贝足丝分泌数量显著高于对照组(P<0.05),然而5‑HT注射无显著促进足丝分泌作用(P>0.05)。基于此,本发明实现了通过注射外源神经递质提高贻贝足丝分泌数量,对研究贻贝足丝分泌机制及其生理调控作用奠定了重要基础。
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专利类型
发明专利
申请/专利号
CN202410340422.7
申请日期
2024-03-25
公开/公告号
CN118236360A
公开/公告日
2024-06-25
主分类号
A61K31/137(2006.01) A A61 A61K A61K31
分类号
A61K31/137(2006.01) A61P43/00(2006.01) A61K49/00(2006.01) G01N33/483(2006.01) A61K31/137 A61P43/00 A61K49/00 G01N33/483
主申请人地址
201306 上海市浦东新区沪城环路999号
专利代理机构
上海伯瑞杰知识产权代理有限公司
代理人
曹莉
国别省市代码
上海;31
主权项:
1.一种促进贻贝分泌足丝的外源注射神经递质,其特征在于,所述外源注射神经递质为肾上腺素。 2.根据权利要求1所述的促进贻贝分泌足丝的外源注射神经递质,其特征在于,所述肾上腺素的筛选方法如下: S1.贻贝的筛选:选择壳长为7-8cm的二龄厚壳贻贝作为实验对象; S2.贻贝足丝分泌不同时期神经递质含量测定:将贻贝静止期、足探索期、足丝分泌期、足丝分泌后期的足组织作为样品,分别进行神经递质含量测定,结果表明,肾上腺素和五羟色胺在足探索期的相对含量显著高于静止期; S3.神经递质注射后贻贝足丝分泌数量的变化测定:对贻贝注射神经递质肾上腺素和五羟色胺,并在注射后不同时间点对贻贝足丝分泌数量进行统计;结果表明,经注射10-3M肾上腺素72h后贻贝足丝分泌数量显著高于对照组,而五羟色胺注射无显著促进足丝分泌作用。 3.根据权利要求2所述的促进贻贝分泌足丝的外源注射神经递质,其特征在于,步骤S2中,将贻贝放入水中静止5-10分钟取足组织作为静止期样品;贻贝足伸出体外进行探索时取足组织作为足探索期样品;在贻贝分泌足丝时取足组织作为足丝分泌期样品;在贻贝分泌完足丝缩回体内5-10分钟后取足组织作为足丝分泌后期样品。 4.根据权利要求2所述的促进贻贝分泌足丝的外源注射神经递质,其特征在于,步骤S2中,收集的所有贻贝足组织需迅速置于液氮中,不同阶段的足组织样品数需大于等于6。 5.根据权利要求2所述的促进贻贝分泌足丝的外源注射神经递质,其特征在于,步骤S3中,所述神经递质的注射部位为贻贝的闭壳肌。 6.根据权利要求2所述的促进贻贝分泌足丝的外源注射神经递质,其特征在于,步骤S3中,肾上腺素和五羟色胺粉末溶于贻贝生理盐水后进行注射,所述贻贝生理盐水的成分包括:20mM HEPES,436mM NaCL,53mM MgSO4,10mM KCL,10mM CaCl2。 7.根据权利要求5所述的促进贻贝分泌足丝的外源注射神经递质,其特征在于,步骤S3中,注射液中肾上腺素和五羟色胺的浓度为10-2M~10-5M,注射量为200μL。 8.根据权利要求2所述的促进贻贝分泌足丝的外源注射神经递质,其特征在于, 步骤S3中,在注射后6h,12h,24h,48h和72h,分别对贻贝所分泌的足丝数量进行统计。 9.权利要求1所述的促进贻贝分泌足丝的外源注射神经递质的应用,其特征在于,应用方法是向贻贝的闭壳肌注射肾上腺素,来促进其足丝分泌。
法律状态
实质审查