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重组人胰岛素原的克隆表达及其在Ⅰ型糖尿病检测中的初步应用

摘要目的:构建人胰岛素原原核表达载体,诱导表达获得重组蛋白,并验证重组人胰岛素原在Ⅰ型糖尿病胰岛素自身抗体检测中的价值。 方法:采用PCR逐步合成法获得目的基因,构建原核表达质粒pBVIL1/INS,转化大肠杆菌E.coliHB101,诱导表达获得纯化重组蛋白,用重组蛋白作为包被抗原,初步建立检测胰岛素自身抗体的ELISA方法。 结果:获得了可被Ⅰ型糖尿病患者血清识别的重组人胰岛素原。以重组人胰岛素原作为包被抗原初步建立的ELISA方法,其敏感性和特异性分别为54.5%和100%。 结论:重组人胰岛素原具有良好的抗原性,可作为Ⅰ型糖尿病患者辅助诊断试剂的候选抗原。

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