检索历史 清除

摘要研究背景：<br>　　登革热是一种蚊媒病毒型传染病，病原体是登革病毒（DENV)，该病毒分为四种血清型（DENV1-4），主要的传播媒体是埃及伊蚊。近几十年来登革热已由一种散发性疾病发展为一个重要公共卫生问题，随着登革热流行地区的扩大，发病和重症人数的不断增多，并由此带来重大的经济和社会问题。登革热在100多个国家和地区流行，主要流行地区为东南亚、南美洲、西太平洋地区、非洲和东地中海地区，在过去的50年间登革热发病率增加了约30倍。2014年6月以来，广东省爆发20年来最大的登革热疫情，广东全省共有20个地市累计报告登革热病例4万余例，主要以1型DENV为主，重症病例多且出现死亡病例。<br>　　能早期诊断登革热对患者的治疗和疾病的防控非常重要。病毒分离是诊断的金标准，但耗时较长。病毒核酸检测技术，在发病早期的1天内就可进行登革病毒的鉴定和分型诊断，是目前较好的登革热早期诊断方法，其敏感性高于病毒分离，可用于早期快速诊断及血清型鉴定，但对实验室条件有较高的要求。血清学检测主要检测登革病毒特异性IgM和IgG抗体，由于登革病毒与黄病毒科其它成员之间存在共同抗原簇，因而容易出现交叉反应，而且要等到发病的第4-5天才可以检出IgM抗体，故其不能很好地满足临床早期诊断的需要。NS1抗原检测在国外主要用于科研，在国内尚未用于临床诊断。<br>　　研究目的及意义：<br>　　本研究通过对NS1抗原、病毒核酸和IgM抗体检测3种临床常用的登革热病毒感染检测方法进行比较，探讨登革病毒NS1抗原检测用于临床早期诊断的价值。<br>　　研究方法：<br>　　1.收集236例住院登革热患者系列血清或血浆样品746份，采用酶联免疫吸附法检测登革病毒NS1抗原，采用Panbio登革热IgM/IgG捕获ELISA法检测血清或血浆中特异性抗体，RT-PCR检测病毒载量。对3种检测方法阳性率进行比较，探讨NS1抗原检测在登革热早期诊断的意义。<br>　　2.收集121份登革热患者发病第2至12天的血清标本，对每份血清标本均进行登革热病毒NS1抗原、登革病毒核酸和登革病毒特异性IgM抗体检测检测。探讨NS1抗原检测检测与其他检测方法联合应用是否能够提高登革热诊断敏感性。<br>　　3.收集38例住院登革热患者系列血清或血浆样品298份，至少包含发热期和极期中的3个时点。采用Panbio登革热IgM/IgG捕获ELISA法检测血清或血浆中特异性的抗体。每个样品做3个复孔，取平均值后使用试剂盒公式算出PanbioUnits值。依据抗体的动态变化进行初次/二次感染判定，并与常用的依据IgM/IgG比值判定方法比较。<br>　　研究结果：<br>　　1.从第2天开始各时间的的NS1抗原阳性率均高于病毒核酸检测阳性率，其中第7天至第11天差异具有统计学意义（P＜0.05）。第1天至第10天NS1抗原阳性率高于IgM抗体阳性率，第1天至第5天和第7天差异具有统计学意义（P＜0.05）。<br>　　2.NS1抗原检测、病毒核酸检测和特异性IgM抗体检测的阳性率分别为83.5％、88.4%和100%。NS1抗原联合病毒核酸检测的阳性率为96.7%，NS1抗原联合IgM抗体检测的阳性率为100%，病毒核酸联合IgM抗体检测的阳性率为99.2%。<br>　　3.观察到5种不同的登革病毒特异IgM和IgG抗体反应趋势。依据IgG反应趋势可区分成2组。一组IgG在病程的第4-5天可检测到，呈现快速上升。另一组在病程的第7天可检测到，一直维持在低的水平。依据IgM和IgG抗体反应趋势判定轻症样品中初次感染11例（29.7%）；轻症样品中二次感染9例（24.4%）；重症样品中初次感染7例（18.9%）；重症样品中二次感染10例（27.0%）。组间比较无统计学差异。<br>　　结论：<br>　　1.应用登革病毒NS1抗原检测方法可在早期有效诊断登革热病毒感染。<br>　　2.NS1抗原检测敏感性最高，联合IgM抗体检测可提高诊断的敏感性。<br>　　3.通过比较初次感染和二次感染在轻症与重症组之间的差异，表明2014年登革热疫情中，二次感染可能不是SD的主要危险因素。